福建农业学报３１（１０）：１０７５￣１０７９，２０１６ Ｆｕｊｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｉｎｙｘｂ．ｃｎ ｄｏｉ：１０．１９３０３／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—０３８４．２０１６．１０．０１４ 林江波，王伟英，李海明，等．铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生ＣＪ７．福建农业学报，２０１６，３１（１０）：１０７５—１０７９． ＬＩＮ Ｊ－Ｂ。ＷＡＮＧ Ｗ—Ｙ，ＬＩ Ｈ—Ｍ， ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ／Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉ０ｎ ａｎｄ Ｐｌａｎｔｌｅｔ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｅｍｓ ｆｒｏｍ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ Ｋｉｍｕｒａ ｅｔ Ｍｉｇｏ ＥＪ］．Ｆｕｊｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１６，３１（１０）：ｌ０７５—１０７９． 铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生 林江波，王伟英，李海明，吴水金，邹 晖，李跃森，戴艺民 （福建省农业科学院亚热带农业研究所，福建 漳州 ３６３００５） 摘要：为建立铁皮石斛Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ茎段原球茎途径的快繁技术体系，以带腋芽的无菌茎段为材料， 利用正交试验的方法，研究基本培养基、植物生长调节剂、蔗糖质量浓度和添加物对原球茎的诱导、增殖与分 化和生根的影响。结果表明，原球茎诱导的最佳培养基为１／２ＭＳ＋６－ＢＡ４ ｍｇ・Ｌ 十ＮＡＡ０．１ ｍｇ・Ｌ＿’；原球 茎增殖与分化的最佳培养基分别为Ｍｓ＋蔗糖３０ ｇ・Ｌ 和１／２Ｍｓ＋蔗糖１０ ｇ・Ｌ－１＋马铃薯泥１０ ；生根的最 佳培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ１ ｍｇ・Ｌ－１＋马铃薯泥１Ｏ ＋香蕉泥１Ｏ ，成功建立了铁皮石斛茎段从原球茎诱导到 植株再生的组培技术体系。 关键词：铁皮石斛；原球茎；正交试验；植株再生 中图分类号：Ｓ ５６７．２３９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１Ｏ０８—０３８４（２０１６）１０—１０７５—０５ Ｐｒｏｔｏｅｏｒｍ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ／Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｌａｎｔｌｅｔ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｅｍｓ ｆｒｏｍ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ Ｋｉｍｕｒａ ｅｔ Ｍｉｇｏ ＬＩＮ Ｊｉａｎｇ—ｂｏ，ＷＡＮＧ Ｗｅｉ—ｙｉｎｇ，ＬＩ Ｈａｉ—ｍｉｎｇ，ＷＵ Ｓｈｕｉ－ｊｉｎ，ＺＯＵ Ｈｕｉ，ＬＩ Ｙｕｅ－ｓｅｎ，ＤＡＩ Ｙｉ—ｍｉｎ （Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｆ ｉａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｚｈａｎｇｚｈｏｕ， Ｆｕｊｉａｎ ３６３００５．Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ，ｓｔｅｒｉｌｅ ｓｔｅｍ ｃｕｔｔｉｎｇｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａ，ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ，ｓｕｃｒｏｓｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ａｎｄ ａｄｄｉｔｉｖｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｉｎ ａｎ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ １／２ＭＳ＋６－ＢＡ４ ｍｇ・Ｌ～ ＋ＮＡＡ０．１ ｍｇ・Ｌ－。；ｔｈａｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ＭＳ＋３０ ｇ・Ｌ－。；ｔｈａｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ＭＳ＋１０ ｇ・Ｌ ｓｕｃｒｏｓｅ＋１０ ｐｏｔａｔｏ ｓｌｕｒｒｙ；ａｎｄ，ｔｈａｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ，１／ ２ＭＳ＋ＮＡＡ１ ｍｇ・Ｌ ＋１０ ｐｏｔａｔｏ ｓｌｕｒｒｙ＋１０ ｂａｎａｎａ ｓｌｕｒｒｙ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ａｐｐｅａｒｅｄ ｔｏ ｅｎａｂｌｅ ａ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ；ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ；ｐｌａｎｔｌｅｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ 铁皮石斛Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ Ｋｉｍｕｒａ ｅｔ 安徽等地均有分布，由于种子自然条件下萌芽率低 以及人为的过度采集，自然资源濒Ｉ临枯竭。采用组 织培养技术，可以短时间内生产出大量的种苗供人 工种植。有关铁皮石斛的组织培养已有不少的研究 报道，主要是种子播种［６］、诱导丛芽Ｌ７］及原球 茎＿８ 三类途径。 Ｍｉｇｏ是兰科石斛属多年生附生草本植物，中国传 统的珍贵中药材。中国药典 记载，其味甘，性微 寒，归胃、。肾经；具有益胃生津，滋阴清热的功 效，用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚 热，目暗不明等症。近代医学研究表明：铁皮石斛 多糖具有增强免疫力 引、抗肿瘤 、降血糖 及抗 氧化 等作用。 铁皮石斛在我国的福建、云南、广西、浙江、 收稿日期：２０１６—０４—１１初稿；２０１６—０６—２８修改稿 组培工厂化生产育苗要求配方稳定，繁殖系数 高，成本低和种苗质量稳定。近几年来，在铁皮石 斛产业发展的推动下，出现了很多从事铁皮石斛组 作者简介：林江波（１９７６一），男，硕士，副研究员，主要从事农业生物技术研究 ＊通讯作者：戴艺民（１９６９一），男，博士，研究员，主要从事农业生物技术研究（Ｅ—ｍａｉｌ：２１４３５１７０４＠ｑｑ．ｃｏｒｎ） 基金项目：福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项（２０１４Ｒ１０１３—３） １０７６ 福建农业学报 第３ｌ卷 织培养的企业，主要是采用种子播种的方式。由于 使用的果荚没有严格把关，生产出来的种苗分化、 混杂现象严重，种植出来的产品，品质无法保证， 反而严重影响了铁皮石斛产业的发展。通过茎段原 球茎的途径，生产出的种苗都来源于同一母本，性 状整齐一致，可以解决种子播种的种苗混杂问题， 且繁殖系数高；但是，原球茎增殖与分化的控制难 度较大，生产上没有得到广泛应用。本研究以本课 题组保育的福建冠豸山野生铁皮石斛的茎段为材 料，采用正交设计法对茎段原球茎的诱导、原球茎 增殖与分化及生根的培养基配方进行筛选，以期建 立一整套铁皮石斛茎段原球茎途径的组培生产技术 流程，应用于工厂化生产。 １材料与方法 １．１试验材料 试验材料是采自福建冠豸山野生铁皮石斛，种 植于亚热带农业研究所温室大棚。选择健康，无病 虫害为害的当年生的嫩茎，去除叶片，带回实验室。 １．２试验方法 １．２．１ 茎段消毒 茎段先用自来水冲洗干净，再 用流水冲洗５ ｍｉｎ，然后用无菌滤纸吸干表面水 分。在超净工作台上，将茎段剪成３ ｃｍ长的小段， 每段带１～２个茎节。先用７５ 的酒精浸泡３０ ｓ， 再放入０．１ 升汞溶液中浸泡６ ｍｉｎ；之后用无菌 水冲洗３次，再用无菌滤纸吸干，在无菌碟子上切 去两端伤口，并切成带一个节的小段，接种到不同 的诱导培养基上。 １．２．２ 培养基的配置 试验采用ＭＳ、１／２ＭＳ、 ＶＷ为基本培养基，根据不同的培养阶段添加不同 浓度和配比的植物生长调节剂（ＮＡＡ和６－ＢＡ）， 并添加马铃薯和香蕉等附加物，其中马铃薯去皮称 重后切成小块，煮烂打成浆后使用，成熟香蕉剥皮 后称重，并研磨成香蕉泥使用。所有培养基添加琼 脂７ ｇ・Ｌ～，调节ｐＨ值为５．６，在１２１℃条件下 灭菌２０ ｍｉｎ，冷却凝固后使用。 １．２．３ 原球茎的诱导 试验采用正交设计 Ｌ。（３。），研究基本培养基（ＭＳ、１／２ＭＳ、ＶＷ）、 ＮＡＡ（Ｏ．１、０．５、１ ｍｇ・Ｌ ）和６－ＢＡ（１、２、４ ｍｇ・Ｌ ）对原球茎诱导率的影响，每个培养基组 合添加蔗糖３０ ｇ・Ｌ＿。。将茎段接种到不同培养 基，每个处理接种３０瓶，每瓶接１个茎段，３次 重复。 １．２．４原球茎的增殖与分化 试验采用正交设计 Ｌ。（３。），研究基本培养基（ＭＳ、１／２ＭＳ、Ｖｗ）、 不同蔗糖含量（１０、２０、３０ ｇ・Ｌ ）和马铃薯泥 质量分数（５ 、１０ 、２０％）对原球茎增殖与分 化的影响，筛选原球茎增殖与分化的适宜培养基。 选取淡绿色，顶端有叶原基，尚无真叶分化的原球 茎，切成１．０～１．５ ｃｍ直径的团块，接种到不同培 养基。每个处理接种２Ｏ瓶，每瓶接１ｏ块，３次 重复。 １．２．５ 生根培养 为筛选适宜的生根培养基，采 用正交设计Ｌ。（３。）对ＮＡＡ（０．１、０．５、１．０ ｍｇ・Ｌ ）、马铃薯泥质量分数（５ 、１Ｏ 、 ２ｏ ）和香蕉泥质量分数（５ 、１０ 、２０ ）的 适宜用量进行研究，每个培养基添加蔗糖２Ｏ ｇ・Ｌ＿。。将高约１．０～１．５ ｃｍ的小苗接种到不同 的生根培养基，每个处理接种２０瓶，每瓶接１２ 丛，每丛３～４个芽，３重复。 １．２．６ 培养条件 各培养阶段的光照时间１２ ｈ・ｄ～，培养室温度为（２７±２）℃，光照强度 ４ ０００～５ ０００ ｌｘ。 １．３数据统计分析 原球茎诱导率／ 一［诱导出原球茎的茎节数／ （总接种数一污染数）］×１００％ 原球茎增殖率／ 一［（未分化原球茎质量一接 种质量）／接种质量］×１００％ 原球茎分化率／ 一［（已分化原球茎质量一接 种质量）／接种质量］×１００ 未分化的原球茎呈淡绿色，顶端有叶原基，但 无真叶分化，已分化的原球茎呈绿色，分化出具有 一片以上小叶的丛芽。正交试验结果采用ＤＰＳ软 件＿１。。的正交试验方差分析，方差分析的差异显著 性用最小显著差数法（ＬｓＤ）进行平均数的多重 比较。 ２结果与分析 ２．１不同基本培养基、植物生长调节剂配比对茎 段原球茎诱导的影响 将消毒后的茎段接种在原球茎诱导培养上，培 养２Ｏ ｄ左右腋芽开始膨大，３０ ｄ后萌发长出不定 芽。培养２个月后将不定芽切下，转接到同样的培 养基继续培养３个月后统计原球茎诱导率，结果见 表１。通过对各处理因子不同水平的ＳＳＲ检验， 基本培养基和６－ＢＡ对铁皮石斛茎段原球茎诱导率 的影响达到显著水平，ＮＡＡ各水平间差异不显 著。ＭＳ和１／２ＭＳ基本培养基的诱导率均值分别 为２８．５和１７．３，差异不显著，与ＶＷ诱导率均值 差异达到显著水平；６－ＢＡ为４ ｍｇ・Ｌ 的诱导率 第１Ｏ期 林江波等：铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生 １０７７ 均值是２５．５，与１ ｍｇ・Ｌ 的诱导率均值８．３达 到显著差异。因此，铁皮石斛茎段原球茎诱导的最 佳培养基组合为１／２ＭＳ＋６－ＢＡ４ ｍｇ・Ｌ ＋ ＮＡＡＯ．１ ｍｇ・Ｌ－。。 表１ 不同基本培养、不同植物生长调节剂配比对茎段原球茎的诱导效果及ＳＳＲ检验 Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎｄ ＳＳＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ 注：同列数据后大、小写字母分别表示差异极显著（Ｐ＜Ｏ．０１）和显著（Ｐ＜Ｏ．０５）。表３、５同。 ２．２不同基本培养基、蔗糖浓度和马铃薯泥对原 球茎增殖和分化的影响 异；分化以１０ ｇ・Ｌ 最好，分化率均值为４．５３， 与２０ ｇ・Ｌ 和３０ ｇ・Ｌ 的分化率均值达显著差 异。马铃薯泥对增殖和分化的影响均未达到显著差 异，但添加１０ 的马铃薯泥分化苗粗壮。因此， 原球茎增殖的最佳培养基为ＭＳ＋蔗糖３０ ｇ・Ｌ一； 原球茎分化的最佳培养基为１／２ＭＳ＋蔗糖１０ ｇ・Ｌ ＋马铃薯泥１０％。 表３不同处理因子各水平原球茎增殖率和分化率的ＳＳＲ 检验 Ｔａｂｌｅ ３ ＳＳＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｆａｃｔｏｒ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ 不同基本培养基、蔗糖浓度和马铃薯泥对原球 茎增殖和分化的正交实验结果见表２。 表２基本培养基、蔗糖和马铃薯泥对原球茎增殖和分化的 效果 Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｄｉａ，ｓｕｃｒｏｓｅ，ａｎｄ ｐｏｔａｔｏ ｓｌｕｒｒｙ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｉｌ ｐｒｏｔｏｃｏｒｍ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ 通过对各处理因子不同水平的ＳＳＲ检验（表 ３），基本培养基对增殖率和分化率的影响达到极显 著水平：增殖以ＭＳ最好，增殖率均值为１１．９， 与１／２ＭＳ、Ｖｗ的增殖率均值达极显著差异；分 化以１／２ＭＳ最好，分化率均值为５．８７，与ＭＳ的 分化率均值达极显著差异，与Ｖｗ的分化率达显 著差异。蔗糖对增殖率和分化率的影响均达到显著 ２．３马铃薯泥、香蕉泥和ＮＡＡ对生根效果比较 将分化的原球茎接入１／２Ｍｓ＋蔗糖１０ ｇ・Ｌ ＋马铃薯泥１０％，培养２个月，小苗高１．０～１．５ ｃｍ以上转接到生根培养基，培养４个月后统计根 水平：增殖以３０ ｇ・Ｌ 最好，增殖率均值为 ７．６３，与１０ ｇ・Ｌ 的增殖率均值４．４３达显著差 １０７８ 福建农业学报 第３１卷 数、根长和株高。马铃薯泥、香蕉泥和ＮＡＡ对生 根效果的正交试验结果见表４。通过对各处理因子 不同水平的ＳＳＲ检验（表５），ＮＡＡ对根数和根 长的影响达显著水平，对株高的影响不显著；其中 ＮＡＡ含量为１ ｍｇ・Ｌ 时：根数均值为３．４３，与 含量为０．１ ｍｇ・Ｌ 和０．５ ｍｇ・Ｌ 的均值差异显 著；根长均值为４．１７，与含量为０．１ ｍｇ・Ｌ 的 均值差异显著。马铃薯泥对株高的影响达显著水 平，对根数和根长的影响不显著。当加入１Ｏ 马 铃薯泥时，株高的均值为５．６７，与添加５ 马铃薯 泥的均值４．６３差异显著。香蕉泥对根长的影响达 到极显著水平，对根数和株高的影响不显著；加入 １ｏ ９／６和２Ｏ 的香蕉泥时，根长的均值分别为４．２７ 和４．０７，与添加５ 的香蕉泥的根长均值２．７Ｏ达 到极显著差异。综合各因素，铁皮石斛生根的最佳 培养基组合为１／ＺＭＳ＋ＮＡＡ１ ｍｇ・Ｌ ＋马铃薯 泥１Ｏ ＋香蕉泥１０ 。 表５生根效果的ＳＳＲ检验 Ｔａｂｌｅ ５ ＳＳＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｏｏｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ３讨论与结论 原球茎分化是铁皮石斛原球茎途径组织培养的 一个关键环节，分化率的高低直接影响组培工厂化 生产的成本。已有研究表明一定浓度的细胞分裂素 （６一ＢＡ、ＫＴ）和生长素（ＮＡＡ、ＩＢＡ）配合使用 能有效促进铁皮石斛原球茎的分化，但浓度过高 或过低均不利于原球茎的分化［１卜”］。组织培养过 程中激素的使用会在培养材料形成累积的效应，过 高的累积量会引起生产种苗的变异，产生畸形苗。 本研究在不添加激素的条件下，利用正交试验的方 法研究不同基本培养基、蔗糖和马铃薯泥对原球茎 增殖及分化的影响，结果发现：在不添加生长调节 ～ 一账 一 ＂ ¨ 剂的情况下，通过改变基本培养和蔗糖含量，可以 调节铁皮石斛原球茎的增殖率和分化率。在较高大 量元素的基本培养和高蔗糖，原球茎以增殖为主， 最理想的组合是ＭＳ＋蔗糖３０ ｇ・Ｌ一；在较低大 量元素含量的基本培养和低含量蔗糖条件下，原球 茎以分化为主，最理想的组合是１／２ＭＳ ３－蔗糖 １０ ｇ・Ｌ＿。。 在组织培养过程中，香蕉和马铃薯常作为附加 物添加到培养基中，其中可能含有某些尚未知道的 物质，对植物的生长起到一定促进作用。在培养基 中添加马铃薯能提高铁皮石斛原球茎的分化率，而 香蕉汁明显抑制原球茎的分化［】 。李海燕等口 研 究发现，马铃薯泥能明显促进苗生长，但根系较细 小，植株偏瘦弱，且分蘖少。罗焕明等 ６］研究发 现香蕉乳有利于铁皮石斛生根，以１／ＺＭＳ＋ ＮＡＡ０．５ ｍｇ・Ｌ ＋蔗糖３０ ｇ・Ｌ ＋香蕉１００ ｇ・Ｌ 的效果最好。本试验研究结果表明，添加 马铃薯泥虽然对原球茎分化的影响不显著，但是， 能明显提高分化苗的质量，分化苗整齐、叶色浓 绿，长速较快；在生根阶段，马铃薯泥对株高的影 响达显著水平，以１０ 效果最好，而对根数和根 长的影响不显著。香蕉泥对铁皮石斛根长的影响达 到极显著水平，对根数和株高的影响不显著，以 １Ｏ ９／５效果最好。因此，铁皮石斛的生根培养基，同 时加人１０％的马铃薯泥和１０ 的香蕉泥２种附加 物，生根效果最好。 参考文献： Ｅｌｉ中华人民共和国国家药典委员会．中华人民共和国药典Ｅｕ］． 北京：中国医药科技出版社，２０１０：２６５—２６６． ［２］高建平，金若敏，吴耀平，等．铁皮石斛原球茎与原药材免疫 调节作用的比较研究［Ｊ］．中药材，２００２，２５（７）： ４８７—４８９． 第１Ｏ期 林江波等：铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生 １０７９ ［３］张红玉，戴关海，马翠，等．铁皮石斛多糖对Ｓ（１８０）肉瘤 小鼠免疫功能的影响［Ｊ］．浙江中医杂志，２００９，４４（５）： ３８０—３８１． ［４］吴吴妹，徐建华，陈立钻，等．铁皮石斛降血糖作用及其机制 的研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００４，２９（２０）：１６１—１６４． ［５３何铁光，杨丽涛，李杨瑞，等．铁皮石斛原球茎多糖粗品与纯 品的体外抗氧活性研究［Ｊ］．中成药，２００７，２９（９）： ｌ２６５—１２６９． ［６３林江波，戴艺民，邹晖，等．福建铁皮石斛人工繁育技术研究 ［Ｊ］．福建农业学报，２０１０，２５（５）４０６—４１０． Ｅ７３戚华沙，潘梅，黄赛，等．铁皮石斛茎段组织培养技术研究 口］．安徽农学通报，２０１３，１９（１３）：３２—３４． Ｅ８３蒋波，杨存亮，黄捷，等．铁皮石斛原球茎生长分化及生根壮 苗研究［Ｊ］．玉林师范学院学报：自然科学版，２００５，２６ （３）：６６—６９． Ｅ９３林丛发，钟爱清，林云斌，等．铁皮石斛类原球茎增殖和分化 的研究［Ｊ］．江西农业学报，２００７，１９（１）：８４～８６． ＥｌＯ；唐启义，冯光明．实用统计分析及其ＤＰＳ数据处理系统 ＥＭ；．北京：农业出版社，２００２，９４—９９． ［１１］赵兴兵，吴维佳，庞璐，等．珍稀濒危药材铁皮石斛组培快 繁关键技术研究［Ｊ］．湖南中医药大学学报，２０１２，３２（３）： ２７—３０． Ｅ１２３李丹，王馨彩，尹明华．黑节铁皮石斛原球茎诱导、再分化 以及腋芽萌发和生根的初步研究ＥＪ３．上饶师范学院学报， ２０１Ｏ，３０（６）：７４—７８． Ｅ１３３邵世光，侯北伟，周琪，等．基于正交实验法的铁皮石斛原 球茎分化和生根条件研究［Ｊ］．南京师范大学学报：自然科 学版，２００９，３２（４）：９８—１０２． 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