高效液相色谱法测定7_氨基头孢烷酸含量及其有关物质(精)

品不经处理分离便可同时测定样品中两个组分的含 量 , 可以作为含量测定的方法 。

参考文献 〔 1〕 福建省卫生厅 1福建省药品标准 , 1988年版 14761〔 2〕 辽宁省卫生厅 1辽宁省药品标准 , 1987年版 18801

〔 3〕 殷晓建 1H PLC 测定复方黄连素注射液中黄连素和甲氧苄氨嘧啶

含量 , 中国药学杂志 , 1995, 30(4 ∶ 233~2351〔 4〕 李文清 , 等 1高效液相色谱法测定复方黄连素注射液中二组分含

量 , 黑龙江医药 , 1995, 12, 8(6 ∶ 325~3251

高 效 液 相 色 谱 法 测 定 72氨 基 头 孢 烷 酸 含 量 及 其 有 关 物 质

曾晓军 (福建省福抗药业股份有限公司 福州 350002

摘要 :目的 建立一种高效液相色谱法测定 72C 18色谱柱 (4. 6mm ×

250mm , 5Λm , 以 0. 02mol ・ L -1醋酸钠 (pH =5. 5 2乙腈 (930∶ 70 , 0. 7・ -, 263nm , 柱温 35℃ , 样品池温度 8℃ 。 结果 线性范围为 40~360Λg ・ mL -1, r=0. 9999, . 、 快速 、 准确 。

关键词 :高效液相色谱法 ; 72氨基头孢烷酸 ; 中图分类号 :R 92712 文献标识码 :(203

Assay and ted S ubs tances of 72A rninocopha losporac ic Ac id by

HPLC

ZHEN Xiao 2jun (Fujian Fukang P ha r m ace utica l Co . L td , Fuzhou 350002

ABS TRACT :OBJECTI VE A H PL C m ethod w as established fo r the deter m inati on of 72A rn inocophal o s po racic

A cid and it related substances . M ETHOD T he ch rom atograph ic conditi on s w ere as fo ll ow s :M erck C 18co lum n (416mm ×250mm , 5Λm , 0102mo l

. L -1s odium acetate (pH =515 and aceton trile (930∶ 70 as mobile phase , at a fl ow rate of 017mL . m in -1

, at detective w avelength 263nm , te mpeture of the co lum n w as 35℃ , te mperature of

the sa mp le cell w as 8℃

. RESUL TS T he standard curve w as linear in the range of 40~360Λg . mL -1and the co rrelati on coefficien t w as 019999. T he average recovery w as 100186%.CONCL ESI ON T h ism ethod is si m p le , rap id , and accurate . KEY W O RDS :H PL C ; 72A rn inocophal o s po racic A cid ; related substances

72氨基头孢烷酸 (7A CA 是很重要的头孢原料 药中间体 。 其分子结构 (见图 1 。 在其生产过程中 , 除主要的组份 7A CA

外 。还含有少量的去乙酰 72氨 基头孢烷酸 (D -7A CA 、 去乙酰氧 72氨基头孢烷酸 (DO 27A CA 、 头孢烷酸 (CPC 。 本文采用反相高效 液相色谱法分离测定了 7A CA 的含量及其有关物 质 , 在较短时间内完成分离测定 , 重复性 、 精密度及 可靠性良好 , 可用于该品的质量控制 。

作者简介 :曾晓军 :女 , 工程师 , 长期从事药物分析工作 , 联系电话 :

0591— 3810885转品管部

1 仪器与试剂

W aters 248722690高效液相色谱仪 , 瑞士梅特

勒 A G 245电子天平 (十万分之一 , PH S 225酸度计 (上海雷磁仪器厂 , 超声波清洗器 (昆山市超声仪器

有限公司 , M illi 2Q 纯水器 (M illi po re 。

乙腈为色谱纯试剂 (德国 M erck 公司 ; 醋酸钠 、 冰醋酸均为分析纯试剂 。

7A CA 、 D 27A CA 、 DO 27A CA 、 CPC 对照品均由 意大利进口 , 其中 7A CA 含量为 9611%, 批号 392001029。

2 色谱条件 色谱柱 :M erck C 18色谱柱 (416mm

×250mm , 5Λm ; 流动相 :0102mo l ・ L -1

醋酸钠 (用 醋酸调 pH 至 515 2乙腈 (930∶ 70

; 柱温 :35℃ , 样 品池温度 :8℃ ; 检测波长 :263nm ; 流速 :017mL ・

m in -1

; 进样量 :10ΛL 。

・

61・ 海峡药学 2003年 第 15卷 第 3期

3 实验方法与结果

311 系统适用性试验 在该色谱条件下混合对照 品及样品色谱图 (见图 2、 3 。 从图中可以看出 , 各峰 之间均达到基线分离 , 且样品各峰的保留时间同对 照品各峰的保留时间一致 。 色谱系统适用性试验结

果 (见表 1 。

表 1 系统适用性试验结果

保留时间 (

D 27A CA 513749942

DO 27A CA 51983111982177

CPC 61665108502184

771842137704151

图 2 混合对照品色谱图

312 线性关系 精密称取 7A CA 对照品适量 , 加流 动相溶解定容后配成 2m g ・ mL -1的储备液 , 分别取 储备液用流动相稀释成 40、 120、 160、 200、 240、 280、 360Λg ・ mL -1的溶液 , 各进样 10ΛL , 记录峰面积 , 以 峰面积 y 对浓度 x (Λg ・ mL -1 作线性回归 , 得回归 方程 :y =34960x -107535, r =019999, 表明在 40~ 360Λg ・ mL -1范围内线性关系良好 。

313 进样精密度试验 取 7A CA 对照品溶液 10ΛL , 连续进样 5次 , 分别测其峰面积 , R SD 为 0142%

图 3 样品色谱图

4 重复性试验 精密称取同一批号的样品 6份 , 按样品测定法测定 , 结果 (见表

2 。

表 2 重复性试验结果 (%

含 量 平均含量

DO

RS D D 27A CA CA CPC

01710172017201720173017301721104 01610161016201610162016201620189 01450144014501440145014501451116

961579616796142961559615996152961550109

27A

7A CA

315 稳定性试验 取同一份样品溶液 , 每隔 30m in 测定 1次 , 观察其峰面积变化 , 结果 (见表 3 。 316 回收率试验 取已知含量的样品适量 , 精密称

表 3 稳定性试验结果

峰 面 积

0015110115210215310315410

RS D (% D 27A DO

27A

CA CA CPC

7A

CA

2966830417309963142431863323683279533119337484117 3483835059351763511435295350783521235167353350142 2450524632246862451724695245822457024582247140131

489707149269914934974491096749421784904683490626249171864933312013

2定 , 分别加入一定量的 7A CA 对照品 , 按 7A CA 含量

测定方法测定 , 结果 (见表 4 。

表 4 回收率试验结果

加入量 (m g 回收率 (%

平均回收率 (% RS D (%

012023 014046 016069 101149

101140

101127

98161

99194

100101

101168

101159

101178

1001861108

317 样 品 测 定 取 本 品 约 20m g , 精 密 称 定 , 置 100m l 容量瓶中 , 加流动相溶解并稀释至刻度 , 摇 匀 , 取 10ΛL 注入液相色谱仪 , 记录色谱图 ; 另取对照 品适量 , 同法测定 , 按外标法以峰面积计算供试品中 的 7A CA 含量 , 以峰面积归一法计算有关物质的含 量 , 结果 (见表 5 。

表 5 样品测定结果 (%, n =3

批号 7A CA 含量

有 关 物 质

D 27A CA DO 27A CA CPC 01100799712017019015 01100809713018019014 01100829715015019015

01100849613017019015

01100889516016016014

01110899610015015015 4 讨论

411 在流动相的选择中 , 本文先后采用了不同比例 的流动相 , 经实验 , 采用以 0102mo l ・ L -1醋酸钠 (pH =515 2乙腈 (930∶ 70 为本品测定的流动相 , 所 ・ 7 1・

Strait Phar m aceutical Journal V o l 15N o . 32003

得峰形较好 , 分离度令人满意 , 且一次进样约 8m in 即完成色谱分析 , 适宜于中间体的快速检验 。

412 检测波长的确定 从紫外扫描光谱图可见 , 7A CA 在 263nm 波长处有最大吸收 , 而其它 3种组 份在此波长处也有较强吸收 , 为了保证足够的灵敏 度 , 降低样品测定浓度 , 选择 263nm 作测定波长 。 413 由于 D 27A CA 在常温下很不稳定 , 因此样品池 温度选择 8℃ 。在此温度下 , 样品溶液在 4h 内稳定 。 414 曾用不同牌号的 C 18柱对 7A CA 及其有关物质 进行分离测定 , 结果一致 , 证明本法可靠性较好 。 415 根据上述资料表明 , 本方法简便 、 快速 , 灵敏度 高 , 专一性强 , 线性范围广 , 回收率良好 , 流动相便 宜 。 可做为 72氨基头孢烷酸含量及其有关物质的测 定方法 , 为中间体的质量控制提供了参考 。 (致谢 :本文 得到陈佑宝总工程师 、 林梅高级工程师 、 齐雪琴工程师的热情指导 , 在此表示感谢 !

参考文献

〔 1〕 胡昌勤 1高效液相色谱法在抗生素质控分析中的应用 〔 M 〕 , 上 册 , 北京 1气象出版社 , 20011153~1541

〔 2〕 张晓彤 , 云自厚 1液相色谱检测方法 〔 M 〕 , 北京 , 化学工业出版 社 , 2001,

13~141

〔 3〕 傅若农 1色谱分析概论 〔 M 〕 1, 2002, 198~

〔 4, VD , 2000, 北京 , 化学 1~33

分 光 光 度 醇 溶 液 中 替 硝 唑 和 氯 霉 素 的 含 量 唐国荣 1 陈志良 21 王剑萍 1 徐容霞 1 王金娥 1(11中国人民解放军第四七六医院 福州 350002; 21中国人民解放军南方医院 广州 510020

摘要 :目的 对复方芦荟醇溶液的制备及替硝唑和氯霉素含量测定进行研究 。 方法 选择替硝唑和氯霉素组方 , 采用差示 2单波长分光光度法 , 在 277nm 和 319nm 波长处检测 。 结果 平均回收率分别在 99129%(RS D =0132% 和 99148%(RS D =0146% 。 结论 检测方法简便 , 结果准 确 , 适用于该制剂的质量控制 。

关键词 :分光光度法 ; 复方芦荟 ; 替硝唑 ; 氯霉素

中图分类号 :R 92712 文献标识码 :A 文章编号 :100623765(2003 0320018203

D e te r m ina tions of Tinidazole and Chlor m phem icol in Com pound A loin A lcoholL iquor by S pe trophotom e try

TANG Guo 2rong , CHEN Zhi 2liang , L I U S hu 2nan , W ANG J ian 2p ing , XU Rong 2xia , W ANG J in 2e (the 476hosp ita l of the PLA Fu Zhou 350002 (the

Nanfang hosp ita l of the PLA Guang Zhou 510020

ABS TRACT :OBJECTI VE To research the liquo r A l o in alcoho lis compo situm and the deter m ati on s of T in idazo le and Ch l o r mphe m ico l . M ETHOD S It used differen tial si m p le w avelength s petropho tom etry at 277nm and 319nm fo r the liquo r A l o in alcoho lis compo situm . RESUL TS T he recoveries and R SD of rifa mp icin and is on iazid w ere 99129%, 99148%and 0132%, 0146%res pectively . CONCL USI ON T he m ethod w as si m p le and accurate . KEY W O RDS :Spetropho tom etry ; Compound A l o in ; T in idazo le ; Ch l o r mphe m ico l

芦荟为百合科芦荟属植物 A l oc L . 或斑叶芦荟 A . V era . Ch in sis (H a w Berg . , 具有抗菌消炎 , 止痒和 皮肤保健之功效 , 我们根据临床需要 , 特与替硝唑和 氯霉素合用研制了非标制剂复方芦荟醇溶液 , 并建 立了替硝唑和氯霉素的含量测定方法 , 无须分离 , 简 便快速 , 结果准确 , 现报道如下 。

1 仪器与试药

UV 2265紫外分光光度计 (日本岛津 , 替硝唑对 照品 (

药用规格 , 批号 20010304, 湖北广济药业 ; 氯 霉 素 (批号 20010716, 无水乙醇重结晶 , 西南制药

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海峡药学 2003年 第 15卷 第 3期