．３７４． 微生物与感 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄ ！ ！ ！ 鱼 ！ ！ ： ！ ｊ ：！ ： ： ・综述・ 乙型肝炎病毒感染动物模型的研究进展 任蓉蓉 ，任晓楠 ，李顺 ，刘丹慧 ，周晓辉 １．复旦大学附属公共卫生临床中心，上海２０１５０８；２．温州医科大学，温州３２５０３５ 摘要：乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染是威胁全球特别是我国人民健康的重大问题。动物模型是研究ＨＢＶ生物 学特性、感染机制、与宿主相互关系及筛选治疗性药物和疫苗的重要工具。近年来，各种动物模型的发展促 进了ＨＢＶ相关研究，但现有模型均存在一定弊端。经济、适用且与人类感染极度相似的动物模型的缺乏严 重制约着人们对ＨＢＶ的深入研究。本文就已有的ＨＢＶ感染动物模型进行综述，以期为更好模型的建立提 供帮助。 关键词：乙型肝炎病毒；动物模型；肝脏 Ａ ｒｅｖｉｅｗ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ＲＥＮ Ｒｏｎｇ－Ｒｏｎｇ ，ＲＥＮ Ｘｉａｏ－Ｎａｎ ，ＬＩ Ｓｈｕｎ ，ＬＩＵ Ｄａｎ－Ｈｕｉ。，ＺＨＯＵ Ｘｉａｏ－Ｈｕｉ １．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｆｕｄａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１５０８，Ｃｈｉｎａ；２．Ｗｅｎｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｅｎｚｈｏｕ ３２５０３５，Ｃｈｉａ ｎＡｂｓｔｒａｃｔ：Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ（ＨＢＶ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｓ ａ ｍａｊｏｒ ｈｅａｌｔｈ ｐｒｏｂｌｅｍ ｉｎ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ。ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｉｎ Ｃｈｉｎａ． Ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｓｔｕｄｙｉｎｇ ＨＢＶ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ。 ｖｉｒｕｓ—ｈｏｓｔ ｉｎｔｅｒｐｌａｙ，ａｎｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｎｏｖｅｌ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔｓ ａｎｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｉｎ ｒｅｃｅｎｔ ｙｅａｒｓ，ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓ ＨＢＶ．ｒｅｌａｔｅｄ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ．ａｌｌ ｔｈｅ ｅｘｉｓｔｉｎｇ ｍｏｄｅｌｓ ｈａｖｅ ｔｈｅｉｒ ｏｗｎ ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓ．Ｌａｃｋ ｏｆ ｅｃｏｎｏｍｉｃａｌ ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｔｈａｔ ｃｏｕｌｄ ｉｍｉｔａｔｅ ｔｈｅ ｎａｔｕｒａｌ ｃｏｕｒｓｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｈａｓ ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ＨＢＶ．Ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｓ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔ ＨＢＶ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ；Ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ；Ｌｉｖｅｒ ２０世纪８０年代，安全、有效的乙型肝炎病毒 （ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ，ＨＢＶ）疫苗的出现在一定程度上 减缓了ＨＢＶ的传播，但乙型肝炎仍是威胁人类健 康的全球性问题。据世界卫生组织统计，全球有２０ ５３％肝细胞癌来源于ＨＢＶ感染（在非洲和中国比 例更高）＿２］。ＨＢＶ是人类已知的最小ＤＮＡ病毒， 基因组长约３．２ ｋｂ，为部分双链ＤＮＡ。此外，它属 于肝脱氧核糖核酸科，有严格的嗜肝性和种属特异 性，一般侵犯肝脏组织，引起急性和慢性肝炎，且自 然状态下只能感染人和少数灵长类动物［３］。这样的 亿例ＨＢＶ感染者，其中３．５亿例为慢性携带者，每 年新发４００万例急性ＨＢＶ感染ｌ１］，有接近６０万例 死于乙型肝炎并发症。携带ＨＢＶ表面抗原（ＨＢＶ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎ，ＨＢｓＡｇ）的慢性乙型肝炎患者在某 些国家占比达２０％，甚至更高。全球３０％肝硬化和 特性使得应用动物模型研究ＨＢＶ受到。因 此，获得一种合适的ＨＢＶ感染动物模型至关重要。 基金项目：上海市科技发展基金实验动物研究项目（１２１４０９００３００），上海市卫生和计划生育委员会科研课题（２０１４４Ｙ００７３），上海市公共卫生临 床中心科研课题面Ｅ项目（２０１４Ｍ０８） 通信作者：周晓辉 Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ．ＺＨＯＵ Ｘｉａｏ－Ｈｕｉ，Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｈｏｕｘｉａｏｈｕｉ＠ｓｈａｐｈｃ．ｏｒｇ 任蓉蓉，等：乙型肝炎病毒感染动物模型的研究进展 １非小鼠类ＨＢＶ感染动物模型 黑猩猩是与人类亲缘关系最接近的灵长类动 物，实验条件下可被ＨＢＶ感染，且感染病毒亚型与 共价闭合环状ＤＮＡ（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｃｌｏｓｅｄ ｃｉｒｃｕｌａｒ ＤＮＡ，ｃｃｃＤＮＡ）及ｍＲＮＡ合成，上清液中可检测到 分泌的ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ，故可作为体外研究ＨＢＶ 细胞感染机制的模型｜９］。但树鼠句个体差异较大，感 染效率低，感染ＨＢＶ后病毒载量低且为一过性，对 树嗣进行研究的试剂及抗体不充足等制约着其在 ＨＢＶ研究领域中的应用。 此外，ＨＢＶ相关嗜肝病毒，如鸭乙型肝炎病毒 （ｄｕｃｋ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ，ＤＨＢＶ）、土拨鼠乙型肝炎 接种亚型一致，部分有血清酶浓度增高及肝组织活 检改变，表现出与人类急性乙型肝炎相似的免疫反 应 ］，是研究ＨＢＶ感染过程中宿主抗病毒反应以 及评价疫苗和药物疗效的最佳模型。在此模型中， 发现ＨＢＶ感染的肝细胞损伤主要由免疫介导，且 特异性ＣＤ８ Ｔ细胞在病毒清除和病理损伤中起关 病毒（ｗｏｏｄｃｈｕｃｋ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ，ＷＨＶ）等可分 别感染鸭和土拨鼠。ＤＨＢＶ感染鸭后，基因组主要 键作用＿５ ］。但是，黑猩猩感染ＨＢＶ后症状较人类 轻，很少发展为急性重型肝炎，慢性率也较人类 低＿７］，加上黑猩猩等非人灵长类动物多属濒危物种， 以ｃｃｃＤＮＡ形式存在，且在细胞内高度稳定［１ 。 ＷＨＶ感染的土拨鼠可发生慢性感染并易发生肝细 胞性肝癌ｌｌ１ 。这些ＨＢＶ或ＨＢＶ相关病毒感染模 型对研究ＨＢＶ感染过程及评价疫苗和药物的效果 由于伦理约束、成本昂贵、体型庞大等因素，其在研 究方面的应用受到很大。 由于树鼢与灵长类动物在种系发生上亲缘关系 较近，经济易得，受到了研究者关注。树朐感染 ＨＢＶ后，与人急性自限性肝炎相似：血清中很快出 现抗ＨＢｓＡｇ和抗ＨＢＶ ｅ抗原（ＨＢＶ ｅ ａｎｔｉｇｅｎ， 起了极大作用，但某些使其不能成为研究ＨＢＶ 的常规动物模型（表１）。与上述模型相比，小鼠可 能是更为合适的模型并受到越来越多研究者的重视 与发掘，不同类型的小鼠模型广泛应用于ＨＢＶ相 关研究。 ＨＢｅＡｇ）抗体，ＨＢｓＡｇ消失［８］。此外，用ＨＢＶ体外 感染分离的树嗣原代肝细胞，发现细胞内有ＨＢＶ 表１ ＨＢＶ动物模型及其优缺点 Ｔａｂ．１ Ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ａｎｄ ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｓ ｏｆ ＨＢＶ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ２小鼠类ＩｔＢＶ感染动物模型 ２．１转基因小鼠 并增殖）。然而，对于介导ＨＢＶ进人肝细胞的受 体，最近有报道称钠离子／牛磺胆酸共转运蛋白 （ｓｏｄｉｕｍ ｔａｕｒｏｃｈｏｌａｔｅ ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ， 理想的ＨＢＶ转基因小鼠模型应是表达人 ＨＢＶ受体的转基因小鼠，这样可更好地模拟ＨＢＶ 感染人肝细胞的过程（自然吸附、进入肝细胞、复制 ＮＴＣＰ）是人ＨＢＶ的功能性受体之一＿１ ，但小鼠 ＮＴＣＰ中没有发现病毒人侵所需的分子决定基＿１引， 且是否有共受体目前仍不清楚。因此，具有ＨＢＶ 微生物与感染Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，Ｄｅｃｅ啦 ｅｒ ！ ！ 鱼 ： ！ ：曼璺Ｑ 受体的转基因小鼠模型的建立仍需进一步深入研 究。尽管ＨＢＶ不能自然感染小鼠，但通过不同技 术方法，人们还是建立了众多不同的转基因小鼠模 型并用于ＨＢＶ研究。 转基因技术的主要路线：采用显微注射的方法， 将ＨＢＶ部分、全长或超长基因组注射到小鼠受精 卵中，获得表达ＨＢＶ单基因产物和供ＨＢＶ复制的 转基因小鼠，同时在子代小鼠中也可检测到ＨＢＶ 基因表达 ］。现阶段应用较多的是１．３倍ＨＢＶ基 因组（ＨＢＶ１．３）的转基因小鼠，通过在ＨＢＶ全长末 端添加增强子和调节子，小鼠体内可同时检测到 ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ核心抗原（ＨＢＶ ｃｏｒｅ ａｎｔｉｇｅｎ，ＨＢｃＡｇ） 及ＨＢｅＡｇ［ ］。ＨＢＶ可在肝细胞中复制并释放入 血，但不能继续感染新的肝细胞。有观点认为， ＨＢＶ１．３转基因小鼠在血清学和免疫学方面与经垂 直传播形成的慢性ＨＢＶ感染者相似，是研究ＨＢＶ 垂直传播致乙型肝炎慢性化的较好模型［１ ，但也有 学者认为两者形成的耐受机制及疾病发展后果有所 不同。 虽然这种小鼠模型被广泛应用于研究ＨＢＶ感 染发病机制和筛选抑制ＨＢＶ复制的抗ＨＢＶ药物， 但仍存在一些缺陷：①由于小鼠肝细胞表面缺乏 ＨＢＶ受体，所以该模型不能用于病毒侵入与细胞 间播散的研究；②在转基因小鼠中，ＨＢＶ转录的天 然模板——ｃｃｃＤＮＡ不能被检测到；③由于在胚胎 发育期将ＨＢＶ基因组转入，所以转基因小鼠对 ＨＢＶ组分产生免疫耐受，不能形成肝炎。 在此模型中，乙型肝炎发病机制的研究主要依赖 过继免疫。在这种小鼠体内过继转移针对ＨＢＶ抗 原特异的细胞毒性Ｔ细胞（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ， ＣＴＬ）后，可建立小鼠急性肝炎模型［１７，１８ ；将ＨＢＶ 转基因小鼠与免疫缺陷小鼠［如严重联合免疫缺陷 （ｓｅｖｅｒｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＳＣＩＤ） 小 鼠、重组激活基因１（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｇｅｎｅ １，Ｒａｇ１）缺失（Ｒａｇ１ 一）ｌ２ｏ］小鼠］杂交，得到适应性 免疫缺陷但有ＨＢＶ表达复制的小鼠，然后将同系 小鼠原始脾细胞过继到杂交鼠中，则可产生对ＨＢＶ 的免疫应答并伴肝脏慢性炎症。基于这些模型，发 现对ＨＢＶ的细胞免疫应答（尤其是ＣＴＬ的应答） 程度决定了ＨＢＶ的感染结果ｌ＿２ 。除特异性杀伤 ＨＢＶ阳性细胞外，ＨＢＶ特异性ＣＴＬ可介导炎症因 子（ 干扰素、肿瘤坏死因子ａ）的分泌，通过非细胞 溶解途径抑制ＨＢＶ ＤＮＡ的表达和复制［２ 矧。这 些模型可研究ＨＢＶ感染过程中宿主免疫系统与病 毒的相互关系，加深对ＨＢＶ免疫病理机制的认识。 但此模型操作过程较复杂，且与人感染ＨＢＶ的自 然病程不相符，因此不能广泛应用于对ＨＢＶ的 研究。 ２．２ ｔｔＢＶ转染模型 为进一步模拟ＨＢＶ感染过程中病毒与宿主免 疫系统的相互作用，研究者用不同方法将ＨＢＶ基 因转入小鼠肝细胞中。 ２．２．１ 高压水动力法 高压水动力注射法 （ｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）是在较短的时间内（５～８ ｓ）将大量（体重的８％～１０％）含目的ＤＮＡ的生理 盐水通过尾静脉注射入小鼠体内ｌ２ ，是一种对小鼠 负荷较重但能使注射ＤＮＡ特异性转移到肝的较好 方法。用此种方法注射ＨＢＶ１．３质粒到免疫系统健 全的小鼠中，能引起ＨＢＶ在肝脏复制，血中ＨＢＶ ＤＮＡ可达８×１０。拷贝／ｍｌ。同时，病毒抗原和复制 中间物可引起急性自限性反应。Ｙａｎｇ等在 Ｂ１０．Ｄ２小鼠中观察到ＨＢＶ抗原在高压水动力注 射７ ｄ后消失，伴随抗体产生；注射１５ ｄ后ＨＢＶ转 录和复制中间体被清除，伴随抗病毒性ＣＤ８ Ｔ细 胞反应发生；而在功能性Ｔ细胞、Ｂ细胞、自然杀伤 细胞（ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ，ＮＫ细胞）缺失的非肥胖糖尿病 （ｎｏｎ．ｏｂｅｓｅ ｄｉａｂｅｔｉｃ，ＮＯＤ）／ＳＣＩＤ小鼠中，病毒复 制可持续超过８０ ｄ［２ 。这种方法打破了种族屏障， 增加了ＨＢＶ ＤＮＡ的转染效率。 基于以上研究，陈培哲团队通过高压水动力法 注射以腺相关病毒（ａｄｅｎｏ．ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＡＡＶ） 为载体的ＨＢＶ１．２质粒到有正常免疫应答的 Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内，成功建立了慢性转染模型ｌ＿２ 。 然而，这种模型只有４０％的注射小鼠能持续２４周 表达ＨＢＶ抗原。之后，他们又用８种不同品系小 鼠造模，发现在不同品系小鼠中ＨＢＶ清除率不同， 表明宿主的基因组成在一定程度上影响ＨＢＶ的感 染结果［２ 。周晓辉课题组的实验结果也支持上述 结论：用高压水动力法注射ｐＡＡＶ．ＨＢＶＩ．２Ｎ粒到 Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ小鼠中，近９０％小鼠ＨＢＶ持续感染达 ４６周ｌ２ ，表明Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ小鼠更适合用于ＨＢＶ持 续感染的研究。因此，应根据不同实验目的选用不 同品系的小鼠。这种基于高压水动力的ＨＢＶ转染 模型为体内研究ＨＢＶ持续感染提供了可能。 另一种基于高压水动力法研究体内ｃｃｃＤＮＡ 的模型由邓强团队构建：将ｌｏｘ．Ｐ嵌合到紧接质粒 骨架的ＨＢＶ单倍基因组内含子中，通过Ｃｒｅ／ｌｏｘＰ 系统剪接去除质粒骨架，在肝细胞核中形成含嵌合 任蓉蓉，等：乙型肝炎病毒感染动物模型的研究进展 体的重组ｃｃｃＤＮＡ。在转录过程中，嵌合体随内含 子被剪切，从而获得ｃｃｃＤＮＡ，达到不影响ＨＢＶ生 活周期的目的。这种模型可在正常免疫系统小鼠中 研究ｃｃｃＤＮＡ在ＨＢＶ持续感染中所起的作用，供 基于ｃｃｃＤＮＡ靶点药物的研究¨２ 。 需注意的是，高压水动力转染模型由于短时间 内将大剂量基因组导入小鼠体内，会造成小鼠肝脏 或其他组织物理损伤，可能产生非特异性影响。 ２．２．２腺病毒载体和ＡＡＶ包含ＨＢＶ １．３的腺病 毒载体ＡｄＨＢＶ可有效将ＨＢＶ基因转染至肝细 胞＿３ 。静脉注射ＡｄＨＢＶ后，ＨＢＶ可在小鼠肝脏 成功复制，肝脏中丙氨酸转移酶（ａｌａｎｉｎｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＡＬＴ）上升并产生ＨＢＶ特异性 Ｔ细胞。在诱导Ｂ细胞应答、血清抗体转阳并产生 中和抗体后，感染结束＿３ 。这种由腺病毒介导的 ＨＢＶ感染是急性自限性的，可用于研究免疫介导 的病毒清除机制。但由于免疫系统对腺病毒载体的 应答，这种模型不能建立ＨＢＶ长期感染。为克服 这一障碍，有研究者尝试用低剂量腺病毒载体获得 持续性ＨＢＶ感染模型＿３ ，可用于研究慢性ＨＢＶ 感染的发病机制和新的治疗药物。 与低剂量腺病毒载体相似，应用重组ＡＡＶ载 体也可构建ＨＢＶ慢性感染模型。在ＡＡＶ２／８介导 的ＨＢＶ转染小鼠模型中，血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和 ＨＢＶ ＤＮＡ可持续至少１年Ｉ＿３引。与临床ＨＢＶ携带 者相似，这种ＡＡＶ／ＨＢＶ小鼠血清抗体阴性，用传 统ＨＢＶ疫苗加佐剂铝免疫，不能诱导产生针对 ＨＢＶ的免疫反应。用ＣｐＧ（Ｔｏｌｌ样受体９的兴奋 剂）佐剂与ＨＢｓＡｇ联合免疫，不仅能使机体清除病 毒血症，还可产生Ｔ细胞和Ｂ细胞免疫应答，ＨＢＶ ＤＮＡ复制和蛋白表达减少［３ 。ＡＡＶ／ＨＢＶ小鼠 可用于研究ＨＢＶ免疫耐受的形成机制及筛选评估 ＨＢＶ免疫治疗的方法。 ２．３人源化小鼠 在以上小鼠模型中，ＨＢＶ并不是真正通过感 染进入小鼠肝细胞，因此这些模型不能反映ＨＢＶ 的自然感染状态。 ２．３．１人肝嵌合小鼠为更好地模拟ＨＢＶ自然 感染，研究者尝试将人肝细胞移植至小鼠体内，建立 了“三嵌合体”小鼠模型。正常小鼠经射线全身照射 灭活免疫系统后，给予ＳＣＩＤ小鼠骨髓重建造血功 能，形成可接受外来移植物的环境；然后，移植ＨＢＶ 感染的人肝细胞至肾被膜下。在此“三嵌合体”模型 中，８５％的小鼠在移植１个月后仍能检测到人肝组 织存在。小鼠发生ＨＢＶ病毒血症，病毒滴度最高 为２．５×１０ 拷贝／ｍｌ血液，持续时间只有２０ ｄ左 右＿３引。这种模型适用于免疫治疗的短期研究，并可 作为ＨＢＶ感染蛋白疫苗的研究模型。然而，肾被 膜中存活的肝细胞数量很少且不能形成正常肝组织 结构；模型建立极其费时，不适合大规模实验；移植 的人肝细胞维持功能时间段短等不足严重影响了其 应用。 为使人肝细胞在小鼠体内的存活时间延长且具 有肝脏的正常功能，易被ＨＢＶ感染，研究人员经过 大量努力建立了多种稳定表达人肝细胞的小鼠模 型。这些模型的构建思路：运用免疫缺陷小鼠，防止 发生移植排斥反应；在小鼠体内表达有肝脏毒性的 基因使小鼠肝脏损伤，从而为人肝细胞的植入提供 空间。目前常用的有以下几种模型。 尿激酶型纤溶酶原激活物（ｕｒｏｋｉｎａｓｅ ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ，ｕＰＡ）／ＳＣＩＤ小鼠模型：应 用转基因技术，将肝脏的白蛋白（ａｌｂｕｍｉｎ，Ａｌｂ）启 动子与ｕＰＡ基因相关联。这种Ａｌｂ—ｕＰＡ小鼠在肝 脏中大量表达ｕＰＡ，可观察到肝细胞大量死亡。然 后，将Ａｌｂ－ｕＰＡ小鼠与ＳＣＩＤ小鼠杂交，获得的 Ａｌｂ．ｕＰＡ／ＳＣＩＤ小鼠可接受人肝细胞植入，且人肝 细胞嵌入达１５％ｌ＿３ 。这种嵌合小鼠带有人肝细胞， 因而可被ＨＢＶ感染，便于研究ＨＢＶ侵入及复制的 生理机制，但免疫缺陷和易出血的特点使其易于感 染及受伤死亡。 Ｆａｈ 一Ｒａｇ２ 一Ｉ１２ｒｇ＿ 一小鼠模型：这种小鼠 缺失延胡索酰乙酰乙酸水解酶（ｆｕｍａｒｙｌａｃｅｔｏａｃｅｔａｔｅ ｈｙｄｒｏｌａｓｅ，Ｆａｈ）、Ｒａｇ２、白细胞介素２受体 链 （ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ， ｃｈａｉｎ，Ｉ１２ｒｇ）基因。Ｆａｈ 是酪氨酸代谢途径的关键酶，其缺失会导致毒性酪 氨酸积累，小鼠发生肝损。而移植的人肝细胞由于 人Ｆａｈ的存在得以保留下来并表现出一定的生长 优势。在这种人肝嵌合小鼠（ＦａｈＩ。一Ｒａｇ２－。一 Ｉ１２ｒｇ一／一）中可建立ＨＢＶ的有效感染Ⅲ３ ，ＨＢＶ持 续扩增达６个月＿３ 。 反式四环素转录活化因子（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖａｔｏｒ，ｒｔＴＡ）／ｓＣＩＤ小鼠模型： 为克服以上２种小鼠模型出生死亡率高、手术窗口 期短且手术难度高的问题，研究人员构建了ｒｔＴＡ／ ＳＣＩＤ小鼠。ｒｔＴＡ小鼠的ｒｔＴＡ受小鼠Ａｌｂ启动子 ，将ｒｔＴＡ小鼠与ＳＣＩＤ小鼠杂交，得到ｒｔＴＡ／ ＳＣＩＤ小鼠。在构建的重组腺病毒载体Ａｄ．ＴＲＥ。 ｕＰＡ中，ｕＰＡ位于四环素效应元件（ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ 微生物与感染Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２５，２０１５，１０（６）：３７４．３８０ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ，ＴＲＥ）下游。用Ａｄ．ＴＲＥ—ｕＰＡ 处理ｒｔＴＡ／ＳＣＩＤ小鼠，这样在多西环素（四环素衍 生物）的存在下，ｒｔＴＡ与ＴＲＥ结合而促使下游基因 ｕＰＡ开放转录，ｕＰＡ在肝细胞中表达并引起广泛肝 脏损伤，诱导肝细胞的损伤程度可受Ａｄ．ＴＲＥ．ｕＰＡ 剂量口 。这种模型灵活性强，诱导肝脏损伤的 处理方法简单，可人为选择肝脏损伤程度和时间点。 ＴＫ—ＮｏＧ小鼠模型：是一种可使移植的人肝脏 组织及功能长期保持稳定而不需使用外源性药物的 人肝嵌合小鼠模型。ＴＫ．ＮｏＧ小鼠利用由肝脏 Ａｌｂ启动子控制的工型单纯疱疹病毒胸苷激酶 （ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ工ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ， ＨＳＶｔｋ）与环氧鸟苷（ｇａｎｃｙｃｌｏｖｉｒ，ＧＣＶ）结合，形成 强毒性代谢物，并作为ＤＮＡ和ＲＮＡ链的终止剂使 小鼠肝细胞死亡，继而可移植人肝细胞。在这种模 型中，人肝细胞功能可持续８个月＿３ 。 人肝嵌合小鼠模型能被ＨＢＶ感染，肝细胞核 内可形成ｃｃｃＤＮＡ，有助于在体内研究ＨＢＶ感染 过程，并用于药物检测，是研究ＨＢＶ感染的较好模 型。但由于没有正常免疫系统，小鼠死亡率很高，且 不能研究ＨＢＶ引起的免疫病理机制，不适用于慢 性ＨＢＶ感染及治疗性疫苗的研究。同时，模型构 建复杂、费用昂贵也了其发展。 ２．３．２人肝／免疫系统双嵌合小鼠 以上人肝嵌合 小鼠模型没有功能性免疫系统，只能支持ＨＢＶ感 染和复制，但没有明显的肝脏疾病形成＿３ 。对于 ＨＢＶ感染模型来说，小鼠体内既有人免疫系统，又 有人肝细胞，更接近人体内ＨＢＶ感染及其引起的 免疫病理状态。 ＡＦＣ８．ｈｕＨＳＣ／Ｈｅｐ小鼠模型，即用ＦＫ５０６结 合蛋白（可抑制排斥反应）和受Ａｌｂ启动子的 半胱天冬酶８（ＡＦＣＳ）处理ＢＡＬＢ／Ｃ Ｒａｇ２ 一 ｃ－／一 小鼠，导致肝脏损伤；同时联合移植同基因的人 ＣＤ３４ 造血干细胞（ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ，ＨＳＣ） 和肝脏祖细胞，形成有效的人白细胞和肝细胞。这 种小鼠可被丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ） 感染，并引起相应的免疫应答和肝脏疾病¨４ 。另一 种模型是用携带两套小鼠Ａｌｂ启动子的ｕＰＡ 新品系免疫缺陷小鼠ｕＰＡ－ＮＯＧ，在６周时通过注 射人肝细胞和造血干细胞重建人肝脏和免疫细 胞＿４ｌ＿］。还有研究人员用人造血干细胞和肝脏祖细 胞重建免疫缺陷的Ａ２／ＮＳＧ小鼠［包含人类白细胞 抗原（ｈｕｍａｎ ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ａｎｔｉｇｅｎ，ＨＬＡ）．Ａ２基因的 ＮＯＤ．Ｃｇ－Ｐｒｋｄｃ（ＳＣＩＤ）Ｉ１２ｒｇ ｔｍｌＷｊｌ／ＳｚＪ小鼠］，得 到的Ａ２／ＮＳＧ．ｈｕＨＳＣ／Ｈｅｐ小鼠可支持ＨＢＶ感 染，接近７５％的ＨＢＶ感染小鼠持续感染至少４ 个月Ｅ４２３。 值得注意的是，这几种肝细胞和造血干细胞来 源于同基因的模型只能检测到很少的人肝细胞嵌 入。如用ＨＬＡ不匹配的造血干细胞和成熟人肝细 胞移植可达到较高的人肝细胞嵌合。用 －√ Ｒａｇ２ ＩＩ２ｒｇＩ√ＮｏＤ小鼠（ＦＲＧＮ）经二甲磺酸 丁酯（抗肿瘤药）和Ａｄ：ｕＰＡ处理后，共移植成人 肝细胞和造血干细胞。移植后的４个月中人肝嵌合 超过８０％且造血细胞水平较高。此外，还检测到人 肝脏巨噬细胞（Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞）在嵌合肝中的表 达 引。这种双嵌合小鼠可用于研究ＨＢＶ感染状态 下肝脏与免疫系统的相互作用。 但以上小鼠模型中，胸腺并不人源化，因此还不 完全具有人免疫系统的特点。最近的ＨＩＳ．ＨＵＨＥＰ （人免疫细胞和人肝细胞）小鼠，是在有ｕＰＡ的 ＢＡＬＢ／ｃ Ｒａｇ２ 一ＩＩ２ｒ７ ＮＯＤ．ｓｉｒｐａ小鼠 移植人免疫细胞和造血细胞。在此小鼠中可检测到 至少５个月高水平的人肝嵌合和人骨髓淋巴细 胞Ｊ４ ，为研究嗜肝病毒的免疫病理机制及筛选药物 和疫苗提供了广阔平台。 不过，以上模型所用小鼠为免疫缺陷鼠，死亡率 高，对环境的要求较严格；所需人组织来源受限；所 需操作精细，对操作者要求高；模型构建复杂。这些 因素都成为发展这种新型小鼠的瓶颈。 综上所述，ＨＢＶ感染动物模型在技术和内容 上不断丰富和完善，各模型有各自的特点被用于不 同研究，对ＨＢＶ分子生物学和感染人体后的相关 病理机制、与人免疫系统的相互作用及药物和疫苗 的研究起了关键作用。但人们也认识到：乙型肝炎 尚未完全被攻克，针对ＨＢＶ还有一系列重要的科 学问题需探索，如ＨＢＶ进入肝细胞的过程和机制、 病毒持续感染的决定性分子机制、ｃｃｃＤＮＡ持续存 在的原因等，而现有的各种模型均有一定弊端。因 此，还需进一步完善动物模型，使其来源方便、经济 适用、能极度模拟ＨＢＶ感染人体的完整过程及人 体应答。只有通过合适的动物模型对有关ＨＢＶ感 染的关键问题阐述清楚，人们才能找到有效战胜乙 型肝炎的方法。 参考文献 ［１］Ｓｔａｓｉ Ｃ，Ｓｉｌｖｅｓｔｒｉ Ｃ，Ｖｏｌｌｅｒ Ｆ，Ｃｉｐｒｉａｎｉ Ｆ．Ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ＨＣＶ ａｎｄ ＨＢＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ 任蓉蓉，等：乙型肝炎病毒感染动物模型的研究进展 ｅｒａ ｏｆ ｎｅｗ ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉ．ＨＢＶ ｖａｃｃｉｎｅ［Ｊ／ ＯＬ］．Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ，２０１５．ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ． ｓｃｉｅｎｃｅｄｉｒｅｃｔ．ｃｏｍ／ｓｃｉｅｎｃｅ／ａｒｔｉｃｌｅ／ｐｉｉ／Ｓ１８７６０３４１１５００１０１Ｘ． Ｅ２］Ｃｒｏａｇｈ ＣＭ，Ｌｕｂｅｌ ＪＳ．Ｎａｔｕｒａｌ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ：ｐｈａｓｅｓ ｉｎ ａ ｃｏｍｐｌｅｘ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ［Ｊ］．ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏ１，２０１４，２０（３０）：１０３９５—１０４０４． －１３］Ｇｌｅｂｅ Ｄ，Ｂｒｅｍｅｒ ＣＭ．Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｖｉｒｏｌｏｇｙ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ［Ｊ］，Ｓｅｍｉｎ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓ，２０１３，３３（２）：１０３．１１２． Ｅ４］Ｂａｒｋｅｒ ＬＦ，Ｍａｙｎａｒｄ ＪＥ，Ｐｕｒｃｅｌｌ ＲＨ，Ｈｏｏｆｎａｇｌｅ ＪＨ， Ｂｅｒｑｕｉｓｔ ＫＲ，Ｌｏｎｄｏｎ ＷＴ，Ｇｅｒｅｔｙ ＩＬｌ，Ｋｒｕｓｈａｋ ＤＨ． Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｃｈｉｍｐａｎｚｅｅｓ：ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｂｔｙｐｅｓ［Ｊ＝．Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，１９７５，１３２（４）：４５１－４５８． Ｅ５］Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｖｉｒａｌ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｇ，１９９７，９９（７）：１４７２．１４７７． ［６］Ｔｈｉｍｍｅ Ｒ，Ｗｉｅｌａｎｄ Ｓ，Ｓｔｅｉｇｅｒ Ｃ，Ｇｈｒａｙｅｂ Ｊ，Ｒｅｉｍａｎｎ ＫＡ，Ｐｕｒｅｅｌｌ ＲＨ。Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｍｅｄｉａｔｅ ｖｉｒａｌ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｄｕｒｉｎｇ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｌ Ｊ １．Ｊ Ｖｉｒｏ１，２００３，７７（１）：６８－７６． －１７］Ｇａｇｎｅｕｘ Ｐ，Ｍｕｃｈｍｏｒｅ ＥＡ．Ｔｈｅ ｃｈｉｍｐａｎｚｅｅ ｍｏｄｅｌ： ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｒＪ］．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２００４，９６：２８９．３１８． －１８］Ｗａｌｔｅｒ Ｅ，Ｋｅｉｓｔ Ｒ，Ｎｉｅｄｅｒｂｓｔ Ｂ，ＰｕＩｔ Ｉ，Ｂｌｕｍ ＨＥ． Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｐａｉａ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ［Ｊ］．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，１９９６，２４（１）：１－５． ｒ９］Ｇｌｅｂｅ Ｄ，Ａｌｉａｋｂａｒｉ Ｍ，Ｋｒａｓｓ Ｐ，Ｋｎｏｏｐ ＥＶ，Ｖａｌｅｒｉｕｓ ＫＰ， Ｇｅｒｌｉｃｈ ＷＨ．Ｐｒｅ－ｓｌ ａｎｔｉｇｅｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｐａｉａ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ［Ｊ］．Ｊ Ｖｉｒｏｌ，２００３，７７（１７）：９５１１－９５２１． ｒ１０］ Ｒｅａｉｃｈｅ ＧＹ，Ｌｅ Ｍｉｒｅ ＭＦ，Ｍａｓｏｎ ＷＳ，Ｊｉｌｂｅｒｔ ＡＲ．Ｔｈｅ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｏｆ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｕｃｋ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｃｌｏｓｅｄ ｃｉｒｃｕｌａｒ ＤＮＡ ｉｓ ｎｏｔ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｕｐｏｎ ｎｅｗ ｖｉｒａｌ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［．Ｉ］．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２０１０，４０６（２）：２８６－２９２． ［１１］Ｊａｃｏｂ ＪＲ，Ｓｔｅｒｃｚｅｒ Ａ，Ｔｏｓｈｋｏｖ ＩＡ，Ｙｅａｇｅｒ ＡｌＥ，Ｋｏｒｂａ ＢＥ， Ｃｏｔｅ ＰＪ，Ｂｕｅｎｄｉａ ＭＡ，Ｇｅｒｉｎ ＪＬ，Ｔｅｎｎａｎｔ ＢＣ．Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｗｏｏｄｃｈｕｃｋ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ Ｎ－ｍｙｃ ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｓｉｚｅ ａｎｄ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ ｇｒａｄｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ１．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００４，３９（４）：１００８．１０１６． ［１２］ｒａｎ Ｈ，ＺｈｏｎｇＧ，ＸｕＧ，ＨｅＷ，ＪｉｎｇＺ，Ｇａｏｚ，ＨｕａｎｇＹ， Ｑｉ Ｙ，Ｐｅｎｇ Ｂ，Ｗａｎｇ Ｈ，Ｆｕ Ｌ，Ｓｏｎｇ Ｍ，Ｃｈｅｎ Ｐ，Ｇａｏ Ｗ， Ｒｅｎ Ｂ，Ｓｕｎ Ｙ，Ｃａｉ Ｔ，Ｆｅｎｇ Ｘ，Ｓｕｉ Ｊ，Ｌｉ Ｗ．Ｓｏｄｉｕｍ ｔａｕｒｏｃｈｏｌａｔｅ ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｉｓ ａ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ａｎｄ Ｄ ｖｉｒｕｓ［Ｊ／ＯＬ］．Ｅｌｉｆｅ， ２０１２．ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｍｃ／ａｒｔｉｃｌｅｓ／ ＰＭＣ３４８５６１５． ［１３］Ｙａｈ Ｈ，Ｐｅｎｇ Ｂ，Ｈｅ Ｗ，Ｚｈｏｎｇ Ｇ，Ｑｉ Ｙ，Ｒｅｎ Ｂ，Ｇａｏ Ｚ， Ｊｉｎｇ Ｚ，Ｓｏｎｇ Ｍ，Ｘｕ Ｇ，Ｓｕｉ Ｊ，Ｌｉ Ｗ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ａｎｄ Ｄ ｖｉｒｕｓ ｅｎｔｒｙ ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｓｏｄｉｕｍ ｔａｕｒｏｃｈｏｌａｔｅ ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ［Ｊ］． Ｊ ｖｉｒｏｌ，２０１３，８７（１４）：７９７７．７９９１． ｒ１４］Ａｒａｋｉ Ｋ，Ｍｉｙａｚａｋｉ Ｊ，Ｈｉｎｏ Ｏ，Ｔｏｍｉｔａ Ｎ，Ｃｈｉｓａｋａ Ｏ， Ｍａｔｓｕｂａｒａ Ｋ，Ｙａｍａｍｕｒａ Ｋ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｇｅｎｏｍｅ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ ・３７９・ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９８９，８６（１）：２０７－２１１． Ｌ１５Ｊ Ｇｕｉｄｏｔｔｉ ＬＧ，Ｍａｔｚｋｅ Ｂ，Ｓｃｈａｌｌｅｒ Ｈ，Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．Ｈｉｇｈ．１ｅｖｅｌ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｌ＿Ｊ］．Ｊ Ｖｉｒｏｌ， １９９５，６９（１Ｏ）：６１５８．６１６９． ［１６］Ｄｅｍｂｅｋ Ｃ，Ｐｒｏｔｚｅｒ Ｕ．Ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ［Ｊ］．Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１５，２０４（１）：９５．１０２． ［１７］Ｍｏｒｉｙａｍａ Ｔ，Ｇｕｉｌｈｏｔ Ｓ，Ｋｌｏｐｃｈｉｎ Ｋ，Ｍｏｓｓ Ｂ，Ｐｉｎｋｅｒｔ ＣＡ， Ｐａｌｍｉｔｅｒ ＲＤ，Ｂｒｉｎｓｔｅｒ ＲＬ，Ｋａｎａｇａｗａ Ｏ。Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｒＪ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９０，２４８ （４９５３）：３６１－３６４． ［１８］Ｇｕｉｄｏｔｔｉ ＬＧ，Ｍａｔｚｋｅ Ｂ，Ｐａｓｑｕｉｎｅｌｌｉ Ｃ，Ｓｈｏｅｎｂｅｒｇｅｒ ＪＭ， Ｒｏｇｌｅｒ ＣＥ，Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ（ＨＢＶ） ｐｒｅｃｏｒｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ＨＢＶ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｒＪ］．Ｊ Ｖｉｒｏ１，１９９６，７０（１０）：７０５６．７０６１． ［１９］Ｌａｒｋｉｎ Ｊ，Ｃｌａｙｔｏｎ Ｍ，Ｓｕｎ Ｂ，Ｐｅｒｃｈｏｎｏｃｋ ｃＥ，Ｍｏｒｇａｎ ＪＬ， Ｓｉｒａｃｕｓａ ＬＤ・Ｍｉｃｈａｅｌｓ ＦＨ，Ｆｅｉｔｅｌｓｏｎ ＭＡ．Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｎａｔ Ｍｅｄ，１９９９，５（８）：９０７．９１２． ［２０］Ｐｕｂｌｉｃｏｖｅｒ Ｊ，Ｇａｇｇａｒ Ａ，Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ Ｓ，Ｖａｎ Ｈｏｒｎ ＣＭ， Ｇｏｏｄｓｅｌｌ Ａ，Ｍｕｅｎｃｈ ＭＯ，Ｒｅｉｎｈａｒｄｔ ＲＬ，ｖａｎ Ｒｏｏｉｊｅｎ Ｎ， Ｗａｋｉｌ ＡＥ，Ｐｅｔｅｒｓ Ｍ，Ｃｙｓｔｅｒ ＪＧ，Ｅｒｉｅ ＤＪ，Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ Ｐ， Ｃｏｏｐｅｒ Ｓ，Ｂａｒｏｎ ＪＬ．Ａｇｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｈｅｐａｔｉｃ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ ｄｉｒｅｃｔｓ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｔｏ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，２０１３，１２３（９）：３７２８－３７３９． ［２１］Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ，Ｆｅｒｒａｒｉ Ｃ．Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ［Ｊ］．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ，１９９５，１７（２／３）： ２６１．２８１． ［２２］Ｈｅｉｓｅ Ｔ，Ｇｕｉｄｏｔｔｉ ＬＧ，Ｃａｖａｎａｕ【ｇｈ ＶＪ，Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ． Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ＲＮＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｙｔｏｋｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｖｉｒａｌ ＲＮＡ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｏｆ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ＿Ｊ］．Ｊ Ｖｉｒｏｌ，１９９９，７３（１）：４７４－４８１． ｒ２３］Ｇｕｉｄｏｔｔｉ ＬＧ，Ｉｓｈｉｋａｗａ Ｔ，Ｈｏｂｂｓ ＭＶ，Ｍａｔｚｋｅ Ｂ，Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ Ｒ，Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｂｙ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ＩＪ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１９９６，４ （１）：２５－３６． ［２４］Ｌｉｕ Ｆ，Ｓｏｎｇ Ｙ，Ｌｉｕ Ｄ．Ｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃｓ－ｂａｓｅｄ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｎｉｍａｌｓ ｂｙ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ［Ｊ］． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ，１９９９，６（７）：１２５８．１２６６． ［２５］Ｙａｎｇ ＰＬ，Ａｌｔｈａｇｅ Ａ，Ｃｈｕｎｇ Ｊ，Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．Ｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒａｌ ＤＮＡ：ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ＿Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００２，９９（２１）： １３８２５．１３８３０． ［２６］Ｈｕａｎｇ ＬＲ，ｗｕ ＨＬ，Ｃｈｅｎ ＰＪ，Ｃｈｅｎ ＤＳ．Ａｎ ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００６，１０３（４７）：１７８６２—１７８６７． ［２７］ Ｃｈｏｕ ＨＨ，Ｃｈｉｅｎ ｗＨ，ｗｕ ＬＬ，Ｃｈｅｎｇ ｃＨ，Ｃｈｕｎｇ ｃＨ， Ｈｏｒｎｇ ＪＨ，Ｎｉ ＹＨ，Ｔｓｅｎｇ ＨＴ，Ｗｕ Ｄ，Ｌｕ Ｘ，Ｗａｎｇ ＨＹ， Ｃｈｅｎ ＰＪ，Ｃｈｅｎ ＤＳ．Ａｇｅ—ｒｅｌａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｒｅｑｕｉｒｅｓ ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｇｕｔ ・３８０・ 微生物与感染Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄ ｌｎｆｅｃｔｉＱ ！ 里 星 ！ 墨！ Ｑ ！ 鱼 ！兰 ：兰墨 ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ＿Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２０１５，１１２（７）： ２１７５．２１８０． ［２８１ Ｐｅｎｇ ｘＨ，Ｒｅｎ ＸＮ，Ｃｈｅｎ Ｌｘ，Ｓｈｉ ＢＳ，ｘｕ ＣＨ，Ｆａｎｇ Ｚ， Ｌｉｕ Ｘ。Ｃｈｅｎ ＪＬ，Ｚｈａｎｇ ＸＮ，Ｈｕ ＹＷ，Ｚｈｏｕ ＸＨ．Ｈｉｇｈ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎ ａ ｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．ｂａｓｅｄ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｉｎ Ｃ３Ｈ／ＨｅＮ ｍｉｃｅ［Ｊ］． Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１５，２１（１２）：３５２７．３５３６． ［２９］Ｑｉ ｚ，ＬｉＧ，ＨｕＨ，ＹａｎｇＣ，ＺｈａｎｇＸ，ＬｅｎｇＱ，ＸｉｅＹ，Ｙｕ Ｄ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，Ｇａｏ Ｙ，Ｌａｎ Ｋ，Ｄｅｎｓ Ｑ．Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｃｌｏｓｅｄ ｃｉｒｃｕｌａｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ＤＮＡ ｉｎｄｕｃｅｓ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｖｉｒａｌ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ ｍｉｃｅ ｌ＿Ｊ］．Ｊ Ｖｉｒｏｌ，２０１４，８８（１４）：８０４５－８０５６． ［３Ｏ］Ｓｐｒｉｎｚｌ ＭＦ，Ｏｂｅｒｗｉｎｋｌｅｒ Ｈ，Ｓｃｈａｌｌｅｒ Ｈ，Ｐｒｏｔｚｅｒ Ｕ． Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｇｅｎｏｍｅ ｂｙ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ ｖｅｃｔｏｒｓ ｉｎｔｏ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｍｉｃｅ￣ｃｒｏｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ｂａｒｒｉｅｒ［Ｊ１． Ｊ Ｖｉｒｏｌ，２００１，７５（１１）：５１０８－５１１８． ［３１１ Ｉｓｏｇａｗａ Ｍ．Ｋａｋｉｍｉ Ｋ，Ｋａｍａｍｏｔｏ Ｈ，Ｐｒｏｔｚｅｒ Ｕ，Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ａｎｄ ｉｎｔｒａｈｅｐａｔｉｃ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎ ＬＪ］．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，２００５，３３３（２）：２９３－３００． ［３２］Ｈｕａｎｇ ＬＲ，Ｇ￣ｉｂｅｌ ＹＡ，Ｇｒａｆ Ｓ，Ａｒｚｂｅｒｇｅｒ Ｓ，Ｋｕｒｔｓ Ｃ， Ｈｅｉｋｅｎｗａｌｄｅｒ Ｍ，Ｋｎｏｌｌｅ ＰＡ，Ｐｒｏｔｚｅｒ Ｕ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ＨＢＶ ｇｅｎｏｍｅｓ ｕｓｉｎｇ ｌｏｗ ｄｏｓｅｓ ｏｆ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ ｖｅｃｔｏｒｓ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｉｍｍｕｎｅ ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ ｍｉｃｅ［ｊ］． Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１２，１４２（７）：１４４７—１４５０． ［３３１ Ｄｉｏｎ Ｓ，Ｂｏｕｒｇｉｎｅ Ｍ，Ｇｏｄｏｎ Ｏ，Ｌｅｖｉｌｌａｙｅｒ Ｆ，Ｍｉｃｈｅｌ Ｍ Ｌ． Ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｔ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＨＬＡ．Ａ２ ａｎｄ ＨＬＡ－ＤＲ１ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｒＪ］．Ｊ Ｖｉｒｏｌ，２０１３，８７ （１０）：５５５４．５５６３． ［３４］ＹａｎｇＤ，ＬｉｕＬ。ＺｈｕＤ，ＰｅｎｇＨ，ＳｕＬ，ＦｕＹＸ，ＺｈａｎｇＬ． Ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ＨＢＶ ｉｍｍｕｎｏｔｏｌｅｒａｎｃｅ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１４，１１（１）： ７１．７８． ［３５］Ｉｌａｎ Ｅ，Ｂｕｒａｋｏｖａ Ｔ，Ｄａｇａｎ Ｓ，Ｎｕｓｓｂａｕｍ Ｏ，Ｌｕｂｉｎ Ｉ，Ｅｒｅｎ Ｒ，Ｂｅｎ．Ｍｏｓｈｅ Ｏ，Ａｒａｚｉ Ｊ，Ｂｅｒｒ Ｓ，Ｎｅｖｉｌｌｅ Ｌ，Ｙｕｅｎ Ｌ， Ｍａｎｓｏｕｒ ＴＳ，Ｇｉｌｌａｒｄ Ｊ，Ｅｉｄ Ａ，Ｊｕｒｉｍ Ｏ，Ｓｈｏｕｖａｌ Ｄ， Ｒｅｉｓｎｅｒ Ｙ，Ｇａｌｕｎ Ｅ．Ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ－ｔｒｉｍｅｒａ ｍｏｕｓｅ：ａ ｍｏｄｅ１ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ＨＢＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉ．ＨＢＶ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ［Ｊ１．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，１９９９，２９（２）：５５３－５６２． Ｌ３６Ｊ Ｄａｎｄｒｉ Ｍ，Ｂｕｒｄａ ＭＲ，Ｔ６ｒ６ｋ Ｅ，Ｐｏｌｌｏｋ ＪＭ，１ｗａｎｓｋａ Ａ， Ｓｏｍｍｅｒ Ｇ，Ｒｏｇｉｅｒｓ Ｘ，Ｒｏｓｉｅｒ ＣＥ，Ｇｕｐｔａ Ｓ，Ｗｉｌｌ Ｈ， Ｇｒｅｔｅｎ Ｈ，Ｐｅｔｅｒｓｅｎ Ｊ．Ｒｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｕｓｅ ｌｉｖｅｒ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ＿Ｊ］．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２００１，３３（４）：９８１－９８８． ［３７］ Ｂｉｓｓｉｇ ＫＤ，Ｗｉｅｌａｎｄ ＳＦ，Ｔｒａｎ Ｐ，ｌｓｏｇａｗａ Ｍ，Ｌｅ ＴＴ， Ｃｈｉｓａｒｉ ＦＶ，Ｖｅｒｍａ ＩＭ．Ｈｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｍｉｃｅ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ａｎｄ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ＿Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ，２０１０，１２０（３）：９２４．９３０． ［３８］ＳｏｎｇＸ，ＧｕｏＹ，Ｄｕｏ Ｓ，Ｃｈｅ Ｊ，ｗｕＣ，ＯｃｈｉｙａＴ，ＤｉｎｓＭ， Ｄｅｎｇ Ｈ．Ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｔｅｔ—ｏｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｕｒｏｋｉｎａｓｅ ｆｏｒ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｌ Ｊ ．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ，２００９，１７５（５）： １９７５．１９８３． ［３９］Ｈａｓｅｇａｗａ Ｍ，Ｋａｗａｉ Ｋ，Ｍｉｔｓｕｉ Ｔ，Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ Ｋ，Ｍｏｎｎａｉ Ｍ， Ｗａｋｕｉ Ｍ，Ｉｔｏ Ｍ，Ｓｕｅｍａｔｓｕ Ｍ，Ｐｅｌｔｚ Ｇ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｍ， Ｓｕｅｍｉｚｕ Ｈ．Ｔｈｅ ｒｅｃ０ｎｓｔｉｔｕｔｅｄ‘ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ｌｉｖｅｒ’ｉｎ ＴＫ． Ｎ０Ｇ ｍｉｃｅ ｉｓ ｍａｔｕｒｅ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ［Ｊ１．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２０１１，４０５（３）：４０５．４１０． ［４０］Ｗａｓｈｂｕｒｎ ＭＬ，Ｂｉｌｉｔｙ ＭＴ，Ｚｈａｎｇ Ｌ，Ｋｏｖａｌｅｖ ＧＩ， Ｂｕｎｔｚｍａｎ Ａ，Ｆｒｅｌｉｎｇｅｒ ＪＡ，Ｂａｒｒｙ Ｗ，Ｐｌｏｓｓ Ａ，Ｒｉｃｅ ＣＭ， Ｓｕ Ｌ．Ａ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ，ａｎｄ Ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］． Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒ０ｌｏｇｙ，２０１１，１４０（４）：１３３４－１３４４． ［４１］Ｇｕｔｔｉ ＴＬ，Ｋｎｉｂｂｅ ＪＳ，Ｍａｋａｒｏｖ Ｅ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｙａｎｎａｍ ＧＲ， Ｇｏｒａｎｔｌａ Ｓ，Ｓｕｎ Ｙ，Ｍｅｒｃｅｒ ＤＦ，Ｓｕｅｍｉｚｕ Ｈ，Ｗｉｓｅｃａｒｖｅｒ ＪＬ，Ｏｓｎａ ＮＡ，Ｂｒｏｎｉｃｈ ＴＫ，Ｐｏｌｕｅｋｔｏｖａ ＬＹ．Ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｈｅｍａｔｏｌｙｍｐｈｏｉｄ ｄｕａｌ ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ ｉｎ ｔｒｅｏｓｕｌｆａｎ．ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ ｕＰＡ＿Ｎ０Ｇ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ， ２０１４，１８４（１）：１０１—１０９． ［４２］Ｂｉｌｉｔｙ ＭＴ，Ｃｈｅｎｇ Ｌ，Ｚｈａｎｇ Ｚ，Ｌｕａｎ Ｙ，Ｌｉ Ｆ，Ｃｈｉ Ｌ， Ｚｈａｎｇ Ｌ，Ｔｕ Ｚ，Ｇａｏ Ｙ，Ｆｕ Ｙ，Ｎｉｕ Ｊ，Ｗａｎｇ Ｆ，Ｓｕ Ｌ． Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ａ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ：ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ・ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｌｉｖｃｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ａｎｄ Ｍ２－ｌｉｋｅ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ，２０１４， １０（３）：ｅ１００４０３２． Ｌ４３Ｊ Ｗｉｌｓｏｎ ＥＭ，Ｂｉａｌ Ｊ，Ｔａｒｌｏｗ Ｂ，Ｂｉａ１ Ｇ，Ｊｅｎｓｅｎ Ｂ，Ｇｒｅｉｎｅｒ ＤＬ， Ｂｒｅｈｍ ＭＡ， Ｇｒｏｍｐｅ Ｍ． Ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ ｄｏｕｂｌｅ ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｔｈ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ ｉｎ ＦＲＧＮ ｍｉｃｅ ｌＪ １．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ，２０１４，１３（３ Ｐｔ Ａ）：４０４．４１２． ［４４］Ｓｔｒｉｃｋ—Ｍａｒｃｈａｎｄ Ｈ，Ｄｕｓｓ６ａｕｘ Ｍ，Ｄａｒｃｈｅ Ｓ，Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ ＮＤ，Ｌｅｇｒａｎｄ Ｎ，Ｍａｓｓｅ－Ｒａｎｓｏｎ Ｇ，Ｃｏｒｃｕｆｆ Ｅ，Ａｈｏｄａｎｔｉｎ Ｊ，Ｗｅｉｊｅｒ Ｋ，Ｓｐｉｔｓ Ｈ，Ｋｒｅｍｓｄｏｒｆ Ｄ，Ｄｉ Ｓａｎｔｏ ＪＰ．Ａ ｎｏｖｅｌ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｓｔａｂｌｅ ｅｎｇｒａｆｔｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，２０１５，１０ （３）：ｅＯ１１９８２０． （收稿日期：２０１５．０８．０２）
