山东医学高等专科学校学报２０１４，３６（３）：１７９—１８０ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ 不同抗凝剂对网织红细胞检测的影响 陈玲玲。刘平毅 （沂水中心医院，山东临沂２７６４００） 摘要：目的探索不同抗凝剂对网织红细胞检测结果的影响及抗凝血进行网织红细胞计数的 可行性。方法运用试管法行煌焦油蓝染色１５ｍｉｎ后，镜下计数网织红细胞。结果枸橼酸钠抗凝 血组网织红细胞计数（９．８６±３．５７）‰与未加抗凝剂组（１０．０９±３．６Ｏ）‰比较差异无统计学意义（Ｐ ＞０．０５），肝素抗凝剂组网织红细胞计数（７．５２±３．０）‰明显低于未加抗凝剂组，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５）。结论胞计数。 枸橼酸钠抗凝血可以用于网织红细胞计数，肝素抗凝血不适合用于网织红细 关键词：枸橼酸钠；肝素；网织红细胞计数 中图分类号：Ｒ ４４６．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４—０９４７（２０１４）０３—０１７９－０２ 网络出版时间：２０１４—７—１４ １６：５７ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－０９４７．２０１４．０３．００７ 网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３７．１４５１．Ｒ．２０１４０７１４．１６５７．００３．ｈｔｍｌ ＴＨＥ ＥＦＦＥＣＴＳ ｏＦ ＤＩＦＦＥＲＥＮＴ ＡＮＴＩＣｏＡＧＵＬＡＮＴ ＯＮ ＲＥＴＩＣＵＬｏＣＹＴＥ ＤＥＴＥＣＴＩｏＮ ＣＨＥＮ Ｌｉｎｇ—ｌｉｎｇ。Ｌ Ｕ Ｐｉｎｇ—ｙｉ （Ｙｉｓｈｕｉ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｌｉｎｙｉ，Ｃｈｉｎａ ２７６４００） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｄｅｔｅｃ— ｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｅａｓｉｂｌｅ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｃｏｎｄｕｃｔ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｕｎｔ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｕｎｔ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｕｎｄｅｒ ａ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ａｆｔｅｒ ｕｓｉｎｇ ｔｅｓｔ ｔｕｂｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｂｒｉｌｌｉａｎｔ ｃｒｅｓｙｌ ｂｌｕｅ ｓｔａｉｎ １ ５ ｍｉｎ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ （９．８６±３．５７） ｏ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ（１０．０９±３．６０）％０ ｗｉｔｈｏｕｔ ａｎｙ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇ— ｎｉｆｉｅａｎｔ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｕｎｔｉｎｇ（７．５２±３） ｏｆ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ａｐｐｌｙｉｎｇ ｈｅｐａｒｉｎ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ｗｉｔｈｏｕｔ ａｎｙ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔ，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｈａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（Ｐ＜：０．０５）． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｕｎｔ，ｂｕｔ ｔｈｅ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｒｉｎ ｃａｎ’ｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ；Ｈｅｐａｒｉｎ；Ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｏｕｎｔ 网织红细胞（Ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ，Ｒｔｃ）是由骨髓中的 重视。以往多采用试管法检测Ｒｔｃ，将直接采集的 外周血染色后显微镜计数。随着全自动血细胞分析 原红细胞经过多次分裂发育而成的尚未完全成熟的 红细胞，其数量变化是反映骨髓红系造血功能以及 判断贫血和相关疾病的发展、预后以及疗效的重要 仪和各种抗凝剂的使用，也为了减轻病人的痛苦，直 接运用抗凝血来进行染色计数网织红细胞数。本研 究运用含有不同抗凝剂（肝素、枸橼酸钠）的抗凝血 经煌焦油蓝染色后，进行网织红细胞计数，与未加抗 凝剂组比较，以期进一步了解不同的抗凝剂对网织 指标Ⅲ。Ｒｔｃ计数在临床上的应用越来越受到广泛 作者简介：陈玲玲（１９８１一），女，山东省临朐县人，２００９年毕 业于泸州医学院，主管技师，现从事骨髓细胞 学、穿刺细胞学、流式细胞学等检验工作。 收稿日期：２０１４—０１—２８ 红细胞检测的影响，探讨抗凝血行网织红细胞计数 的可行性。 １８０ 山东医学高等专科学校学报 ２０１４年３６卷 １研究对象与方法 血中，因此，检查外周血中网织红细胞数，可以推知 骨髓生红细胞的情况。网织红细胞数量的变化是反 １．１ 标本来源 标本来自２０１４年１月来沂水中心 医院５０例健康体检者，年龄２５～４２岁，平均年龄 ３１岁，所有受试者均为体检合格者。 映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效 的重要指标，也是溶血、失血性贫血患者病情监测的 １．２仪器与试剂 仪器：ＯＬＹＭＰＵＳ显微镜，型号 为：ＢＸ５３。试剂：１０ｇ／Ｌ的煌焦油蓝染液，严格按照 重要实验室参数＿２ ］。网织红细胞检测对慢性贫血 和缺铁性贫血的鉴别也有一定价值＿４］。网织红细胞 增多表示骨髓红系增生旺盛，常见于溶贫、急性失 全国临床检验操作规程配制。 １．３检测方法同一标本分为三组：即肝素抗凝剂 组、枸橼酸钠抗凝剂组、无抗凝剂组。标本采集后同 血、缺铁贫、巨幼贫等［３ ］，减少则表示骨髓造血功 能减低，常见于再障、白血病等Ｌ６］。除此之外，肿瘤 时采用试管法染色，标本与煌焦油蓝染液按１：１比 例混合，３７℃染色１５ｍｉｎ后涂片。镜下计数网织红 细胞，每份标本计数三次，取平均值，将不同抗凝剂 组与无抗凝剂组的网织红细胞的结果进行比较，得 出结论。 １．４统计学处理采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件进行 统计学分析，实验结果均以均数±标准差（）表示， 组间比较采用ｔ检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意 义。 ２结果 枸橼酸钠抗凝剂组网织红细胞计数与未加抗凝 剂组比较，差异无显著性（Ｐ＞０．０５），而肝素抗凝 血网织红细胞计数明显低于未加抗凝剂组，其结果 有显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５），见表１。 表１ 不同抗凝剂对网织红细胞计数影响的结果 ３讨论 网织红细胞是由骨髓中的原红细胞经过多次分 裂发育而成，在其发育过程中红细胞数由一个变为 数个，细胞核由大变小而浓缩，胞浆中血红蛋白逐渐 增多，晚幼红以后细胞不再分裂。发育过程中细胞 核被排出而成为含有多少不等的核糖体、核糖核酸 （ＲＮＡ）等嗜碱性物质的细胞，这些嗜碱性物质经煌 焦油蓝、新亚甲蓝或硫酸奈尔蓝染色后，凝聚成颗 粒，其颗粒又可连缀成线，在胞浆中形成蓝绿或蓝色 的网状结构，故名网织红细胞。网织红细胞进一步 成熟ＲＮＡ消失而成为成熟红细胞。 在正常情况下，骨髓中的有核红细胞并不会释 放至外周血，只有网织红细胞和成熟红细胞才释入 患者放疗、化疗后可极度减低，但骨髓回复造血后网 织红细胞数又逐渐增加，因此，网织红细胞数的变化 可作为肿瘤患者放、化疗后骨髓造血功能受抑制或 者开始恢复造血的较敏感的指标。 有研究证明，ＥＤＴＡ—Ｋ２抗凝血短时间内对网 织红细胞的着色无显著影响［２ ］，而未见关于其它 常用抗凝剂如肝素、枸橼酸钠等对网织红细胞计数 影响的相关报道。本研究结果，枸橼酸钠抗凝剂组 网织红细胞计数与未加抗凝剂组比较一致，而肝素 抗凝血网织红细胞计数明显低于未加抗凝剂组，说 明运用枸橼酸钠抗凝血可以进行网织红细胞计数的 检测，而肝素抗凝血网织红细胞可能不易着色而导 致其计数结果偏低，不适合用于网织红细胞计数，但 其导致网织红细胞计数结果偏低的具体原理以及时 间、温度等其他因素对Ｒｔｃ计数结果的影响还有待 于进一步探讨研究。 参考文献 ［１－Ｉ Ｕｇｎａｒａ Ｃ．Ｕｓｅ ｏｆ ｒｅｔｉｃｕｌｏｃｙｔｅ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｎｄｉｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉ— ａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ口］． Ｉｎｔ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｌａｂ Ｒｅｓ，２００９，２８（１）：１—１１． Ｅ２３褚静英，陆玉霞，羽晓瑜，等，抗凝剂对网织红细胞检测 的影响［Ｊ］．医学检验杂志，２００９，６（１９）：１１５—１１６． ［３］江岩．网织红细胞在贫血疾病诊断中的临床应用［Ｊ］． 航空航天医学杂志，２０１３，２４（１０）：１１９８—１１９９． ［４］ 门剑龙．网织红细胞鉴别慢性病贫血与缺铁性贫血的 价值口］．天津医药，２００３，３１（１２）：７９３． ［５］李付军．缺铁性患者网织红细胞参数测定的临床意义 ［Ｊ］．中外医学研究，２０１３，１１（２８）：１４７—１４８． ［６］钱小玉．网织红细胞检测在白血病诊断中的应用价值 分析［Ｊ］．世界最新医学信息文摘，２０１３，１３（３）：２７８— ２７９． ［７］王琳，滕佩红，姜丽华．ＥＤＴＡＫ２抗凝血对网织红细胞 染色的影响［Ｊ］．１临床军医杂志，２００３，３１（２）：１１９—１２０． （编辑 范 伟）
