一种海水小球藻培养基[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 105002093 A (43)申请公布日 2015.10.28

(21)申请号 201510056507.3(22)申请日 2015.02.02

(71)申请人王兆伟

地址157100 黑龙江省海林市柴河林业局友

谊路170-4号(72)发明人王兆伟(51)Int.Cl.

C12N 1/12(2006.01)C12R 1/(2006.01)

权利要求书1页 说明书2页 附图1页

()发明名称

一种海水小球藻培养基(57)摘要

本发明公开了一种海水小球藻培养基，包括如下组分：NaNO3100-120mg/L，NaH2PO410-12mg/L，柠檬酸铁铵2.5-3.5mg/L，Na2EDTA10-12mg/L，铽盐0.5-1mg/L，芸苔素内酯0.0001-0.01mg/L，VB10.006mg/L，VB120.05mg/L，ZnSO4·4H2O23μg/L，MnCl2·4H2O178μg/L，CuSO4·5H2O10μg/L，Na2MoO4·2H2O7.3μg/L，CoCl2·6H2O12μg/L。本发明在培养小球藻的过程中，使小球藻具有存活率高，生长速率快的特点。

C N 1 0 5 0 0 2 0 9 3 A CN 105002093 A

权 利 要 求 书

1/1页

1.一种海水小球藻培养基，其特征在于，包括如下组分：NaNO3 100-120mg/L，NaH2PO4 10-12mg/L，柠檬酸铁铵2.5-3.5mg/L，Na2EDTA 10-12mg/L，铽盐0.5-1mg/L，芸苔素内酯0.0001-0.01mg/L，VB1 0.006mg/L，VB12 0.05mg/L，ZnSO4·4H2O 23μg/L，MnCl2·4H2O 178μg/L，CuSO4·5H2O 10μg/L，Na2MoO4·2H2O 7.3μg/L，CoCl2·6H2O 12μg/L。

2.根据权利要求1所述海水小球藻培养基，其特征在于，铽盐为氯化铽或乙酸铽。3.根据权利要求1所述海水小球藻培养基，其特征在于，芸苔素内酯的浓度为0.005mg/L。

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CN 105002093 A

说 明 书一种海水小球藻培养基

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技术领域

[0001]

本发明涉及培养基技术领域，尤其涉及一种海水小球藻培养基。

背景技术

小球藻(Chlorella)作为一种重要的微藻资源，具有极其丰富的营养成分和优良的医疗保健作用。其蛋白质含量50％-67％，其中含有人体所必需的20种氨基酸、多种维生素和微量元素，以及亚麻酸、亚油酸、胡萝卜素等成分。其中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，医学临床已经证明这两种成分具有多种重要的生理功能。其次，小球藻含有的多糖和蛋白质具有显著的抗瘤抗癌、增强免疫及抗病毒感染的活性。在水产养殖上，单细胞的小球藻可直接作为草食性鱼类和鱼苗的饵料，或者作为肉食性鱼类仔鱼开口期食用的丰年虫等动物的饵料。此外，小球藻在其生长时能消耗掉污水水体中的部分氮、磷，从而达到改善水质的目的，具有很高的经济价值。[0003] 目前，小球藻的培养方式可分为自养培养和异养培养。小球藻的自养培养既可利用自然光，可利用人工光照，培养基主要由无机化合物组成，最适pH为6.5-7.5，最适光照强度为30-90μmol/(m2·s)，温度为20-30℃。目前，关于小球藻的自养培养技术已经成熟，但是随着细胞的不断增殖，进入培养物的光照被阻挡，导致光合作用减弱，从而了其生物量的进一步提高。

[0002]

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种海水小球藻培养基，在培养过

程中，使小球藻具有存活率高，生长速率快的特点。[0005] 本发明提出的一种海水小球藻培养基，包括如下组分：NaNO3 100-120mg/L，NaH2PO4 10-12mg/L，柠檬酸铁铵2.5-3.5mg/L，Na2EDTA 10-12mg/L，铽盐0.5-1mg/L，芸苔素内酯0.0001-0.01mg/L，VB1 0.006mg/L，VB12 0.05mg/L，ZnSO4·4H2O 23μg/L，MnCl2·4H2O 178μg/L，CuSO4·5H2O 10μg/L，Na2MoO4·2H2O 7.3μg/L，CoCl2·6H2O 12μg/L。[0006] 优选地，铽盐为氯化铽或乙酸铽。[0007] 优选地，芸苔素内酯的浓度为0.005mg/L。

[0008] 本发明还提出的上述海水小球藻培养基的制备方法，向1L海水中加入100-120mg NaNO3、10-12mg NaH2PO4、2.5-3.5mg柠檬酸铁铵、10-12mg Na2EDTA、0.5-1mg铽盐、0.0001-0.01mg芸苔素内酯、0.006mg VB1、0.05mg VB12、23μgZnSO4·4H2O、178μg MnCl2·4H2O、10μg CuSO4·5H2O、7.3μg Na2MoO4·2H2O和12μg CoCl2·6H2O得到海水小球藻培养基。

[0009] 上文中Na2EDTA为乙二胺四乙酸二钠，VB1为维生素B1，VB12为维生素B12。

[0004]

本发明的培养基在培养海水小球藻时具有存活率高，生长速率快的特点。下述的对比实验可以清楚地反应本发明所述培养的特点，使用本发明所提供的培养基比使用f/2培养基更快速地使蛋白核小球藻增殖，蛋白核小球藻能达到的最高浓度也高于对照培养基

[0010]

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CN 105002093 A

说 明 书

2/2页

f/2约20％附图说明

[0011]

图1为本发明的实施例1、实施例2与海水f/2培养基的对比试验结果。

具体实施方式[0012] 下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。[0013] 实施例1

[0014] 本发明提出的一种海水小球藻培养基，包括如下组分：NaNO3 120mg/L，NaH2PO4 12mg/L，柠檬酸铁铵3.5mg/L，Na2EDTA 12mg/L，氯化铽0.5mg/L，芸苔素内酯0.0001mg/L，VB1 0.006mg/L，VB12 0.05mg/L，ZnSO4·4H2O 23μg/L，MnCl2·4H2O 178μg/L，CuSO4·5H2O 10μg/L，Na2MoO4·2H2O 7.3μg/L，CoCl2·6H2O 12μg/L。[0015] 实施例2

[0016] 本发明提出的一种海水小球藻培养基，包括如下组分：NaNO3 120mg/L，NaH2PO4 12mg/L，柠檬酸铁铵3.5mg/L，Na2EDTA 12mg/L，氯化铽1mg/L，芸苔素内酯0.01mg/L，VB1 0.006mg/L，VB12 0.05mg/L，ZnSO4·4H2O 23μg/L，MnCl2·4H2O 178μg/L，CuSO4·5H2O 10μg/L，Na2MoO4·2H2O 7.3μg/L，CoCl2·6H2O 12μg/L。[0017] 实施例3

[0018] 本发明提出的一种海水小球藻培养基，包括如下组分：NaNO3 100mg/L，NaH2PO4 10mg/L，柠檬酸铁铵2.5mg/L，Na2EDTA 10mg/L，乙酸铽1mg/L，芸苔素内酯0.005mg/L，VB1 0.006mg/L，VB12 0.05mg/L，ZnSO4·4H2O 23μg/L，MnCl2·4H2O 178μg/L，CuSO4·5H2O 10μg/L，Na2MoO4·2H2O 7.3μg/L，CoCl2·6H2O 12μg/L。[0019] 以实施例1和实施例2所得到的培养基为实验组，以海水f/2培养基作为对照组。取对数生长期的海水蛋白核小球藻分别接种到实验组和对照组中进行培养，每天光照10h，光照强度约为50μmol/(m2·s)培箱温度控制在25±1℃，每隔一段时间记录培养基中小球藻的OD700和细胞数目。其结果如下表所示，根据其结果绘图得到图1。

[0020]

实施例1实施例2

第0天210210

第3天132113771308

第5天169018051785

第7天221422371978

第9天246224802004

海水f/2培养基210

[0021]

从该表可以看出，使用本发明所提供的培养基比使用F/2培养基更快速地使蛋白核小球藻增殖，蛋白核小球藻能达到的最高浓度也高于对照培养基F/2约20％。说明了本发明供的培养基具有明显优势。[0022] 以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

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CN 105002093 A

说 明 书 附 图

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图1

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