食品研究与开发 生物工程 Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅ￣ｅｌｏｏｍｅｎｔ ２０１１年３月 第３２卷第３期 ｌ４５ 酪蛋白糖巨肽制备及其对致龋齿菌的抑制作用 刘鹏，孙勇民，王苋，杨箐 （天津现代职业技术学院，天津３００２２２） 摘要：酪蛋白巨肽（Ｃａｓｅｉｎ Ｇｌｙｃｏｍａｃｒ０ｐｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＭＰ）是一种来源于哺乳动物Ｋ一酪蛋白，具有６４个氨基酸残基 （１０６～１６９）的糖肽．具有许多生理活性和营养功能，可广泛添加于保健品和医药品中。采用胃蛋白酶水解酪蛋白制备 ＣＧＭＰ，对水解产物中ＣＧＭＰ进行测定，并研究ＣＧＭＰ抑制致龋齿菌生长的生物活性。结果显示：水解产物中确有 ＣＧＭＰ存在，含量为３０．７４％；粗品ＣＧＭＰ对致龋齿菌一变形链球茵具有明显的抑制作用；最小抑茵浓度为２４ｍｇ／ｍＬ。 关键词：糖巨肽；龋齿菌；抑菌作用 Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｓｔｕｄｙ ＯＲ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｓｅｉｎ Ｇｌｙｃｏｍａｃｒｏｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ ｉｔｓ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅ Ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｄｅｎｔａｌ Ｃａｒｉｅｓ Ｂａｃｔｅｒｉａ ＬＩＵ Ｐｅｎｇ，ＳＵＮ Ｙｏｎｇ－ｍｉｎ，ＷＡＮＧ Ｐｅｎｇ，ＹＡＮＧ Ｑｉｎｇ （Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｏｄｅｒｎ Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｔａｎｊｉｎ ３００２２２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃａｓｅｉｎ Ｇｌｙｃｏｍａｃｒｏｐｅｐｔｉｄｅ（ＣＧＭＰ）ｉｓ ａ ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅ ｏｆ ６４ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｒｅｓｉｄｕｅｓ（１０６－１６９）ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｃ—ｔｅｒｍｉｎａｌ ｏｆ ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｋ—ｃａｓｅｉｎ．Ｂｅｃａｕｓｅ ＣＧＭＰ ｈａｓ ｍａｎｙ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｕｎｉｑｕｅ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ，ｉｔ ｃａｎ ｗｉｄｅｌｙ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｆｏｏｄ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ＣＧＭＰ ｗａｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｐｅｐｓｉｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｅｎｚｙｍｅ ｃａｔａｌｙｓｉｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｗｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｔｈｅ ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ＣＧＭＰ ｉｎ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ ａｎｄ ｓｔｕｄｉｅｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｒａｗ ＣＧＭＰ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｄｅｎｔＭ ｃａｒｉｅｓ ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ：ｔｈｅ ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ＣＧＭＰ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ＣＧＭＰ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ ｗａｓ ３０．７４％：ｒａｗ ＣＧＭＰ ｈａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ．Ｔｈｅ ｍｉｎｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｗ ＣＧＭＰ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ ｗａｓ ２４ ｍｇ／ｍＬ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＣＧＭＰ；ｄｅｎｔａｌ ｃａｒｉｅｓ ｂａｃｔｅｒｉａ；ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ 酪蛋白糖巨肽（Ｃａｓｅｉｎ Ｇｌｙｃｏｍａｃｒｏｐｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＭＰ） 是一种具有６４个氨基酸残基的多肽，它是由凝乳酶 （或胃蛋白酶）水解酪蛋白中．（一酪蛋白所得【１１，大量存 在于干酪生产副产物一乳清中，占整个乳清蛋白的 １５％～２０％旧。通常此可溶性的多肽含有较多的糖链， 凝集、降低血压效果等。 此外，ＣＧＭＰ还具有抗龋齿的作用。据丛涛等［４１报 道无糖基化单磷酸化的ＣＧＭＰ对变形链球菌、牙龈卟 啉单胞菌等口腔致病菌具有生长抑制作用。此外，丛涛 等［４１还报道了ＣＧＭＰ能够阻止致龋齿细菌黏附于口腔 龋洞中，从而发挥抗龋作用。多种不同结构的ＣＧＭＰ 因而被称为“糖巨肽”，约有４０％～５０％的ＣＧＭＰ含有 糖链，结合糖链的９０％以上都含唾液酸。因此，唾液酸 为ＣＧＭＰ特性组分，可以利用测定唾液酸的方法来测 糖基化合物都能够不同程度地预防细菌黏附，这使 ＣＧＭＰ非常适合作为口腔卫生产品。 定ＣＧＭＰ。唐传核等［３１的研究表明，ＣＧＭＰ具有以下生 物学活性：促进双歧杆菌增殖；抑制胃酸分泌；抑制病 本研究采用胃蛋白酶水解酪蛋白制备ＣＧＭＰ，对 水解产物中的ＣＧＭＰ进行了测定，并对ＣＧＭＰ抑制致 龋齿菌一变形链球菌生长的特性进行了实验研究。 １材料与方法 原体包括病毒和细菌等黏附至细胞；抑制霍乱等毒素 与受体的结合；调理肠道微生物；由ＣＧＭＰ再降解所 得的一些小肽链还具有类鸦片拮抗作用、抑制血小板 作者简介：刘鹏（１９８２一），男（汉），助教，硕士研究生，从事营养与食 品卫生及食品生物技术方面的研究。 １．１主要材料与仪器 酪蛋白：天津市光复精细化工研究所；胃蛋白酶 ２０１１年３月 食品研究与开发 Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｏｍｅｎｔ 生物工程 第３２卷第３期 —＝＝＝１４８ 酶法提取高品质浒苔膳食纤维工艺 周静峰，何雄，师邱毅 （浙江医药高等专科学校，浙江宁波３１５１００） 摘要：以浒苔为原料，对浒苔膳食纤维提取和漂白工艺条件进行探讨；通过正交试验设计确定酶法提取膳食纤维和漂 白的最佳条件。酶法提取膳食纤维的最佳条件，蛋白酶处理的温度为２５℃、ｐＨ５－，用酶量１％、时间为６０ｍｉｎ；０【一淀粉酶 处理的温度为３０ ｏＣ、ｐＨ６、用酶量０．１％、时间为２０ｍｉｎ；最佳漂白条件，漂白液浓度０．８０％、ｐＨ６、漂白时间１０ｍｉｎ。在此 条件下，提取率为４０．２２％、膨胀力为４５．１３ｍｕｇ、持水力为２ １７１％。产品可作为高品质膳食纤维及理想的食品添加剂。 关键词：浒苔；膳食纤维；提取；漂白 Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｈｉｇｈ－ｑｕａｌｉｔｙ Ｄｉｅｔａｒｙ Ｆｉｂｅｒ ｆｒｏｍ Ｅｎｔｅｒｍｏｒｐｈａ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａ ｗｉｔｈ Ｂｉｏｌｏｇｉｃ Ｅｎｚｙｍｅ ｂｙ Ｕｓｉｎｇ Ｕｎｉｆｏｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ ＺＨＯＵ Ｊｉｎｇ—ｆｅｎｇ，ＨＥ Ｘｉｏｎｇ，ＳＨＩ Ｑｉｕ－ｙｉ （Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｎｉｎｇｂｏ ３１５１００，Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｉｂｅｒｓ ｆｒｏｍ ｅｎｔｅｒｍｏｒｐｈａ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ．Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｉｂｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｂｙ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｗａｓ ２５℃，ｐＨ ５，１％ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ６０ ｍｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｔ—ａｍｙｌａｓｅ ｗａｓ ３０ ｏＣ，ｐＨ ６，０．１％ｏｆｅｎｚｙｍｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ２０ ｍｉｎ；ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｂｌｅａｃｈｉｎｇ ｗｉｔｈ ａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ０．８０％ｂｌｅａｃｈｅｒ ｕｎｄｅｒ ｐＨ ６ ｆｏｒ １０ ｍｉｎ ｇａｖｅ ｔｈｅ ｂｅｔｔｅｒ ｒｅｓｕｌｔｓ．Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｂｌｅａｃｈｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｒａｔｉｏ ｗａｓ ４０．２２％，ｔｈｅ ｓｗｏｌｌｅｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ ４５．１ ３ ｍＬ／ｇ，ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｈｏｌｄｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ ｗａｓ ２ １７ １％．Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｃａｎ ｂｅ ａｓ ｈｉｇｈ－ｑｕａｌｉｔｙ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｉｂｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｄｅａｌ ｆｏｏｄ ａｄｄｉｔｉｖｅｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｅｎｔｅｒｍｏｒｐｈａ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ；ｄｉｅｔａｒｙ ｆｉｂｅｒ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｂｌｅａｃｈｉｎｇ 近年来，膳食纤维（ｄｉｅｔａｒｙ ｆｉｂｅｒ，ＤＦ）在人体健康 浒苔（Ｅｎｔｅｒｍｏｒｐｈａ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ）系世界性的温带性海 中的作用引起了广泛关注，它以其预防、治疗肠道和 藻，藻体草绿色，管状，膜质，丛生，主枝明显，分枝细 心血管系统疾病等特殊功效，及作为一种特殊的食品 长，高可达１ ｍ。生长在中潮带滩涂、岩石上，生长盛期 营养添加剂，被人们誉为“第七营养素”，并被誉为２１世 １２月至次年４月，我国沿海均有出产，但东海沿岸产 纪食品工业中最受关注，具有特殊保健功能和食品改 量最大，尤其在浙江宁波象山港、宁海、奉化等沿海分 性作用的一种食品添加剂。 布广泛，年产量在１ ０００ ｔ左右。浒苔可供食用，宁波沿 基金项目：２００８年浙江医药高等专科学校校级课题（２ｏｏ８ｏｏ６） 海群众早有采集食用习惯，是宁波颇有名气的特产。 作者简介：周静峰（１９７８一），男（汉），实验师，硕士，研究方向：食品 浒苔中含有丰富的藻胶、纤维素、半纤维素、维生素和 科学。 矿物质等，是生产膳食纤维的优质原料。 ●●● ●●◆●◆◆◆●●◆◆●◆◆ ◆◆◆●●●●◆ ◆◆－¨ 科技，２００８（２）：１６８—１７１ 版社，１９８９：３５４—３６４ 【５】曹佐武．，Ｊ、分子肽的Ｔｒｉｃｉｎｅ—ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分离方法［Ｊ】ｌ生物学通 【８］Ｔ Ｌ Ｍｉｋｋｅｌｓｅｎ，Ｈ Ｆｒｏｋｉａｒ，Ｃ Ｔｏｐｐ．Ｃａｓｅｉｎｏｍａｅｒｏｐｅｐｔｉｄｅ ｓｅｌｆ— 报，２００３，３８（３）：５５—５６ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｉｓ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｎ ｗｈｅｔｈｅｒ ｔｈｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｉｓ ｆｒｅｅ ｏｒ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ 【６］张惟杰．糖复合物生化研究技术【Ｍ】．杭州：浙江大学出版社，１９９９： ｉｎ￣－ｃａｓｅｉｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｄａｉｒｙ ｓｃｉｅｎｃｅ，２００５，８８（１２）：４２２８－－４２３８ ４５５－－４５６ 【７】郑钧镛，王光宝．药品微生物学及检验技术【Ｍ】．北京：人民卫生出 收稿日期：２０１０—１２—２２
