您的当前位置:首页正文

结合CHIP-seq和ATAC-seq结果进行分析

来源:花图问答

(一)利用IGV同时查看Chip-seq和ATAC-seq的结果
拿到所有CHIP-seq和ATAC-seq的bw文件,可以在IGV里将这些文件一起导入,然后搜索基因cdc25b,查看基因附近的峰的情况:

文献原图 我做的图

上面两个文件是Chip-seq的峰图(红色,粉色),下面5个是ATAC-seq的峰。可以看出smad2/3在两个基因之间有一个结合的峰(红色),而input是空白对照(粉色),自然不会有峰;但是在下面ATAC-seq的文件里,这个峰与ATAC-seq的峰重合,说明ATAC-seq显示的在这个位置上DNA“容易被接近”,很有可能有smad的结合。

(二)peak可视化
接下来我们要用deeptool进行peak分布的可视化。主要是想重复出文章中的这个图:

这幅图的figure legend的说明是这样的:Histograms show chromatin accessibility at Smad2/3 bound regulatory elements.意思是他们将ATAC-seq里的峰,在smad结合位点附近的peak进行了可视化。

$ computeMatrix scale-regions -a 500 -b 500 -m 250 -R /media/yanfang/FYWD/ATAC/callpeak/SCC_1_CD71hi_GFPlo_narrowPeak.bed /media/yanfang/FYWD/ATAC/callpeak/SCC_1_CD71lo_GFPhi_narrowPeak.bed /media/yanfang/FYWD/ATAC/callpeak/SCC3_Tgfbr2KO_A_peaks_narrowPeak.bed /media/yanfang/FYWD/ATAC/callpeak/SCC3_Tgfbr2KO_B_peaks_narrowPeak.bed -S /media/yanfang/FYWD/CHIPSEQ/sambam/smad_SCC1.bin10.bw --skipZeros -o smad_scaleregion_matrix_TSS_6.gz

NOTE:这里参考文件是4个ATAC-seq的bed文件,输入文件是smad的CHIP-seq文件。(如果把参考文件和输入文件交换位置,最后出来的图不是一个峰,而是M型的双峰)

$ plotProfile -m smad_scaleregion_matrix_TSS_6.gz -out merge_profile_6.png
但是好像趋势和文献中相反的,我又试着重复了文献中的FIG5I,趋势也是和文献相反的。。。比较郁闷,不知道问题出在了哪里,如果有同学知道还请不吝赐教~